[发明专利]多重荧光定量检测新生隐球菌和曲霉菌的试剂盒和方法

权利要求书

1.检测新生隐球菌和曲霉菌多重荧光定量试剂，包括检测新生隐球菌的引物1、检测新生隐球菌的引物2、检测新生隐球菌的探针1、检测曲霉菌的引物3、检测曲霉菌的引物4和检测曲霉菌的探针2；

所述引物1的核苷酸序列为序列2；

所述引物2的核苷酸序列为序列3；

所述探针1的核苷酸序列为序列4；

所述引物3的核苷酸序列为序列6；

所述引物4的核苷酸序列为序列7；

所述探针2的核苷酸序列为序列8。

2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于：所述试剂还包括内标荧光探针3，所述内标荧光探针3的核苷酸序列为序列10。

3.根据权利要求1或2所述的试剂，其特征在于：所述各个探针的两端分别标记荧光基团和淬灭基团。

4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂，其特征在于：

所述引物1、所述引物2、所述探针1、所述引物3、所述引物4、所述探针2和所述探针3的摩尔比为2:2:1:2:2:1:1。

5.检测新生隐球菌和曲霉菌多重荧光定量PCR试剂，包括权利要求1-4中任一所述试剂；

所述各引物在所述PCR试剂中的浓度为0.4uM；

所述各探针在所述PCR试剂中的浓度为0.2uM。

6.含有权利要求1-4中任一所述试剂或权利要求5所述PCR试剂的试剂盒。

7.权利要求1-4中任一所述试剂或权利要求5所述PCR试剂或权利要求6所述的试剂盒在检测或定量检测新生隐球菌和/或曲霉菌中的应用；

或权利要求1-4中任一所述试剂或权利要求5所述PCR试剂或权利要求6所述的试剂盒在制备检测或定量检测新生隐球菌和/或曲霉菌产品中的应用；

或权利要求1-4中任一所述试剂或权利要求5所述PCR试剂或权利要求6所述的试剂盒在制备检测待测样本是否含有新生隐球菌和/或曲霉菌产品中的应用。

8.一种检测待测样本是否含有新生隐球菌和/或曲霉菌的方法，包括如下步骤：用权利要求5所述PCR试剂对待测样本进行实时荧光定量PCR，

若所述待测样本的实时荧光定量PCR结果为如下条件1：在测定新生隐球菌的通道下扩增曲线呈S型或Ct值≤44且Ct值＞0，则所述待测样本含有或候选含有新生隐球菌；若所述待测样本的实时荧光定量PCR结果不为所述条件1，则所述待测样本不含有或候选不含有新生隐球菌；

和/或，

若所述待测样本的实时荧光定量PCR结果为如下条件2：在测定曲霉菌的通道下扩增曲线呈S型或Ct值≤44且Ct值＞0，则所述待测样本含有或候选含有曲霉菌；若所述待测样本的实时荧光定量PCR结果不为所述条件2，则所述待测样本不含有或候选不含有曲霉菌。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的模板为待测样本的DNA。