[发明专利]用于构建布鲁氏菌突变株的质粒pZF17-30及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201710696023.4 | 申请日： | 2017-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN107619833B | 公开（公告）日： | 2021-03-02 |
| 发明（设计）人： | 刘正飞;郑可;汪洋;李娜 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 江丽丽;王敏锋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 构建 布鲁氏菌 突变 质粒 pzf17 30 及其 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.质粒pZF17-30，其特征在于，所述质粒pZF17-30的序列为SEQ ID NO.1所示。
2.利用权利要求1所述质粒pZF17-30构建得到的载体，其特征在于，所述载体的构建方法是：利用限制性内切酶Bsa I酶切质粒pZF17-30，将特异性sgRNA与线性化载体连接，所述的sgRNA为5′-TGGAACAGTCAAAAGAACACCAAGC-3′，5′-CAAAGCTTGGTGTTCTTTTGACTGT-3′，构建的载体的序列如SEQ ID NO.3所示。
3.权利要求2所述的载体在制备布鲁氏菌的单碱基突变株中的应用，其特征在于，所述的单碱基突变为virB10基因CDS区478位碱基由C突变为T。
4.含有权利要求1所述质粒pZF17-30的大肠杆菌，其特征在于，所述的大肠杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC No：M 2017395。
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