[发明专利]一种新的树突状细胞疫苗的制备方法

权利要求书

1.一种新的树突状细胞疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：a.体外合成人源Bcl-2、IL-12p70 mRNA；b.分离和培养DC；C.采用电穿孔的方法将Bcl-2和IL-12p70 mRNA导入DC细胞中。

2.根据权利要求1所述的一种新的树突状细胞疫苗的制备方法，其特征在于所述步骤b.包括以下步骤：b1.从外周血单个核细胞中分离获得单核细胞；b2.用含有GM-CSF和IL-4的无血清培养基诱导培养单核细胞向DC分化；b3.诱导未成熟DC细胞转化为成熟DC，诱导DC成熟用四种因子组合TNF-α、IL-Iβ、IL-6、PGE-2和两种因子组合TNF-α、PGE-2中的任意一种方案；b4.成熟培养1-2天。

3.根据权利要求3所述方法，其中四种因子组合诱导DC成熟所用因子终浓度为：TNF-α5ng/ml，IL-Iβ5ng/ml，IL-6 160ng/ml，PGE-2 1ug/ml。

4.根据权利要求3所述方法，其中两种因子组合诱导DC成熟所用因子终浓度为：TNF-α10ng/ml，PGE-2 10ug/ml。

5.根据权利要求4所述方法，其中Bcl-2最终用量为1-5ug/1*10⁶的细胞。

6.根据权利要求4所述方法，其中IL-12p70最终用量为1-10ug/1*10⁶的细胞。

7.根据权利要求1和4中，使用Bcl-2或者IL-12p70两种因子组合，单独使用任意一种因子，或与其他一种或多种药物、因子组合使用。

8.一种免疫治疗剂，其包含根据权利要求1所述的树突状细胞。

9.一种抗肿瘤疫苗，其包含根据权利要求1所述的树突状细胞。

10.一种用于治疗肿瘤的药物组合物，其包含根据权利要求1所述的树突状细胞。