[发明专利]高效液相色谱拆分那格列奈及其立体异构体的方法

说明书

本发明公开了一种高效液相色谱拆分那格列奈及其立体异构体的方法，将含有那格列奈及其顺式异构体和L‑异构体的混合样品溶于稀释液至浓度0.1~2mg/mＬ；以硅胶表面共价键合有直链淀粉‑三（3‑氯‑5‑甲基苯基氨基甲酸酯）为固定相，用高效液相色谱系统拆分那格列奈及其立体异构体。本发明方法可以快速、高效、并可同时拆分那格列奈及其顺式异构体和L‑异构体。其分离效率高、拆分时间短，顺式异构体与那格列奈之间的分离度为3.82，L‑异构体与那格列奈之间的分离度为9.84，有效实现了一种方法对那格列奈和其顺式异构体和L‑异构体的同时分离和测定，保证了那格列奈产品的有效性和安全性。

技术领域

本发明涉及一种那格列奈及其异构体的拆分方法，属于医药技术领域。

背景技术

那格列奈 (Nateglinide)，化学名为N-（反式-4-异丙基环已基-1-甲酰基）-D-苯丙氨酸，是一种非磺酰脲类口服降血糖药，它通过刺激胰岛素释放而降低血糖，具有起效快和作用时间短的特点。

那格列奈分子的立体结构上存在顺反异构和光学异构现象，市售的强活性物质为反式D构型化合物。有报道称口服1.6 mg/Kg那格列奈与口服100 mg/Kg L-异构体产生的降糖效果相当（约20%），而顺式异构体则无降糖作用。在生产过程中，那格列奈原料药中往往会存在少量的顺式及L构型异构体，为了控制顺式及L构型异构体，我们对那格列奈及其手性异构体进行拆分方法研究，对顺式及L构型异构体同时进行控制，可以从一定程度上保证那格列奈产品的有效性和安全性。

那格列奈及其异构体结构式如下：

那格列奈

顺式异构体

L-异构体

Yang等人报道了一种基于（R）-苯甘酸和3，5-二硝基苯胺键合硅胶手性固定相拆分那格列奈及其L-异构体的方法，以Sumichiral OA-3300 (250×4.6 mm, 5µm)为色谱柱，以0.025mol/L的醋酸铵甲醇溶液为流动相，该方法缓冲液浓度较高，色谱柱使用寿命较短（Gengliang Yang等，Chromatographia. (2002). 56(7): 515-518.）。

此后，Yang等人又报道了一种基于分子印迹聚合物固定相拆分那格列奈及其L-异构体的方法，那格列奈和L-异构体之间的分离度仅有1.94（Gengliang Yang等，Chromatographia, 2004, 59(11): 705-708.）。

Sangaraju等报道了一种基于硅胶表面涂敷有直链淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）固定相拆分那格列奈及其L-异构体的方法，以Chiralpak AD-H (250×4.6 mm, 5µm)为色谱柱，以正己烷：乙醇（90:10）为流动相，那格列奈和L-异构体之间的分离度为8.2。该方法仅对那格列奈和L-异构体进行了拆分。（Sangaraju S 等，Chromatographia, 2009,69(9-10): 1123- 1127.）

Phan, Thanh Dung等采用胶束电动毛细管色谱法拆分了那格列奈及其L-异构体，以甲基-β-环糊精作为背景电解质，那格列奈和L-异构体间的分离度为2.78，那格列奈和L-异构体的保留时间分别为21.34min和22.14min。（Phan, Thanh Dung等，Archives ofpharmacal research, 2010, 33(12): 2017-2024.）。