[发明专利]四种基源郁金共有药效成分的提取方法

权利要求书

1.一种四种基源郁金共有药效成分的提取方法，其特征在于，步骤包括：

1）取郁金饮片，磨粉，过20~40目筛，按照0.05～0.15g/mL的浓度加入95%乙醇，水浴加热回流1h，趁热过滤，滤渣再次加入95%乙醇，重复前述操作，合并两次过滤滤液，滤液旋蒸浓缩至无醇味，按体积比1:10加入蒸馏水，混匀，配制为均一溶液；

2）向步骤1）溶液中加入0.25～0.34倍体积的水饱和正丁醇溶液萃取，重复萃取至萃取液无色，合并萃取液，旋蒸浓缩为膏体；所述正丁醇溶液为现用现配；

3）将步骤2）膏体在70～80℃水浴蒸干，然后加入无水乙醇溶解，之后加入2倍质量的硅胶，混合均匀，再水浴蒸干，研磨至无结块，得到样品混合物；

4）称取硅胶，所述硅胶的质量为步骤3）制备的样品混合物质量的10倍，按 4～6g/mL加入洗脱剂，搅拌至无气泡，装入层析柱中，装实后在层析柱顶端保留有3～4cm高的洗脱剂，然后将步骤3）样品混合物加入到层析柱顶端，用洗脱剂洗脱并控制洗脱速度为3-4 mL/min，收集洗脱液并进行薄层色谱法鉴别，合并鉴别结果一致的洗脱液，浓缩并静置析晶；

5）将步骤4）析出的晶体，用甲醇洗涤、重结晶后，加入二氯甲烷-甲醇溶液至晶体完全溶解，通过0.45 μm滤膜后滴加到Sephadex LH-20凝胶柱中，以流速为0.5～1 ml·min^-1的二氯甲烷-甲醇溶液为洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液并采用薄层色谱法鉴别，合并鉴别结果一致的洗脱液，浓缩并静置析晶，得四种基源郁金共有药效成分。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：步骤1）中，按照0.1 g/mL的浓度加入95%乙醇。

3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：步骤3）中所述硅胶粒度为100～200目。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：步骤4）中所述硅胶粒度为200～300目；洗脱剂为体积比17:3的正己烷-乙酸乙酯混合液。

5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：步骤5）中，所述二氯甲烷-甲醇溶液体积比1:1；所述滴加采用2 mL的针管。

6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述步骤4）、5）中薄层色谱法鉴别，展开与显色条件同2015版《中国药典》一部郁金项下薄层鉴别条件。

7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述的四种基源郁金为温郁金、桂郁金、绿丝郁金和黄丝郁金。

8.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述的共有药效成分核磁共振分析为β-谷甾醇。

9.根据权利要求8所述的提取方法，其特征在于：所述β-谷甾醇结构式如下，

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