[发明专利]环二肽cyclo‑(S)‑pro‑(S)‑phe在防治青枯病和/或稻瘟病中的应用

权利要求书

1.环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe在防治青枯病和/或稻瘟病中的应用。

2.根据权利要求1所述环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe在防治青枯病和/或稻瘟病中的应用，其特征在于：所述的环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe通过如下步骤制备得到：

(1)将大肠埃希氏菌GZ-34进行发酵，得到的发酵液进行固液分离；在得到的上清液中加入乙酸乙酯进行萃取，收集上层有机相，经旋转蒸发后溶解在甲醇中，用孔径为0.22μm的滤膜去除不溶物，得到含活性成分的有机溶液I；

(2)用葡聚糖凝胶LH-20装柱，将含活性成分的有机溶液I上样，通过葡聚糖凝胶LH-20吸附活性成分；再用甲醇洗脱，每收集250ml甲醇洗脱液为一个组分；收集第3个组分，经过旋转蒸发后溶解在甲醇中，过0.22μm的滤膜去除不溶物；

(3)对步骤(2)去除不溶物的馏分3进行半制备高效液相层析；其中，溶剂A相为0.1％(v/v)甲酸，溶剂为色谱纯水；溶剂B相为色谱纯乙腈；洗脱程序为33％B相恒梯度洗脱，3.0mL×min^-1，收集第12-15min的洗脱液，冻干，得到环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe。

3.根据权利要求2所述环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe在防治青枯病和/或稻瘟病中的应用，其特征在于：步骤(1)中所述的发酵所用的发酵培养基为LB培养基。

4.根据权利要求2所述环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe在防治青枯病和/或稻瘟病中的应用，其特征在于：步骤(1)中所述的发酵的条件为于35～37℃，200～250rpm发酵。

5.根据权利要求2所述环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe在防治青枯病和/或稻瘟病中的应用，其特征在于：步骤(1)中所述的固液分离的方式为离心。

6.根据权利要求2所述环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe在防治青枯病和/或稻瘟病中的应用，其特征在于：步骤(1)中所述的乙酸乙酯的用量为与所述的上清液等体积。

7.根据权利要求2所述环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe在防治青枯病和/或稻瘟病中的应用，其特征在于：步骤(2)中所述的用葡聚糖凝胶LH-20装柱中的柱子的柱高为1.0m，柱直径为5cm。

8.根据权利要求2所述环二肽cyclo-(S)-pro-(S)-phe在防治青枯病和/或稻瘟病中的应用，其特征在于：步骤(3)中所述的半制备高效液相层析中的柱子为C18半制备柱Phenomenex,Gemini-NX 5μm C18 110A，250×10.0mm。