[发明专利]人体尿液中环境激素的检测方法

权利要求书

1.一种人体尿液中环境激素的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：

(1)将人体尿液与含有环境激素同位素内标的内标液混合，随后对混合液依次进行有机溶剂萃取和反相SPE净化得到待测样本；

(2)将所述待测样本通过液质联用检测，得到环境激素的种类和含量；

所述步骤(1)中内标液是通过将环境激素同位素内标溶于低碳醇溶液并定容制得；

所述步骤(2)具体包括如下步骤：

步骤(a)：称取环境激素标准品，用甲醇溶解，得到不同浓度的标准液；

步骤(b)：称取甲醇定容后的内标液，随后将内标液分别加入步骤(a)得到的标准液中，超纯水定容后离心，取上清液作为待测标准液；

步骤(c)：将步骤(b)得到的待测标准液和步骤(1)得到的待测样本通过液质联用检测，得到环境激素的种类和含量；

所述步骤(c)液质联用检测的液相色谱条件为：

色谱柱为键合相色谱柱，进样量：5～50μL，流动相包括A和B，其中A为乙酸铵水溶液，B为乙腈甲醇混合溶液，流动相的流速为0.1-2.0mL/min；流动相的梯度，以体积百分比计：

0～3min，A：30～100％、B：70～0％；

3.1～5min，A：10～60％、B：90～40％；

5.1～7min，A：0～50％、B：100～50％；

7.1～9min，A：50～100％、B：50～0％；

9.1min，A：30％、B：70％；

所述键合相色谱柱为C18或C8键合相色谱柱，规格为(50～100)mm×(1.8～3)mm，(1.8～3)μm；

所述液相色谱条件中，流动相A为5～10mmol/L的乙酸铵水溶液，流动相B为乙腈甲醇的混合溶液，乙腈和甲醇两者的质量比为9～1：1～9；

所述步骤(c)中液质联用检测的质谱条件为：采用ESI离子源，负离子MRM扫描，雾化气流速：5～10L/min，气帘气流速：5～20L/min，碰撞气流速：5～10L/min，离子源电压：2000～4500V，离子源温度：200～400℃；

所述环境激素包括邻苯二甲酸单甲基酯、邻苯二甲酸单乙基酯、邻苯二甲酸单丁基酯、邻苯二甲酸单苄基酯、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、双酚A、对羟基苯甲酸丙酯、邻苯二甲酸单乙基己基酯、17α-乙炔基雌二醇、双酚B、己烯雌酚、对羟基苯甲酸丁酯、4-辛基酚和壬基苯酚。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述低碳醇溶液为甲醇溶液。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中有机溶剂萃取的溶剂为乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷和叔丁基甲醚中的一种。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述有机溶剂萃取的溶剂为乙酸乙酯。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中反相SPE的洗脱溶剂为甲醇。