[发明专利]人体尿液中环境激素的检测方法

说明书

本发明提供了一种人体尿液中环境激素的检测方法，涉及环境激素检测技术领域，该检测方法将人体尿液与含有环境激素同位素内标的内标液混合，随后对混合液依次进行有机溶剂萃取和反相SPE净化，上述处理方法可使得人体尿液中各个组分充分溶出，使得检测结果的准确性和稳定性大大提高。同时，上述检测方法采用了液相分离和质谱分析联用的检测方法，实现对人体尿液中环境激素的定性和定量分析，具有灵敏度高、精度高、检测速度快及检测成本低的优点，该检测方法适用于人体尿液中的15种环境激素检测，并能对上述15种环境激素同步进行批量检测，充分满足了实际检测的需要，具有较高的应用价值。

技术领域

本发明涉及环境激素检测技术领域，尤其是涉及一种人体尿液中环境激素的检测方法。

背景技术

环境激素是指环境中存在的一些干扰生物体内分泌的化学物质。其能被生物体吸收，并且会通过食物链不断富集，导致人与动物的生殖系统、内分泌系统、神经系统、免疫系统等出现多种病变、癌变、畸变。近几年来，国内外在研究食品中环境激素方面比较成熟，但关于环境激素人体暴露水平的研究较少。

现有的环境激素的分析检测还没有统一的标准技术方法。同时，人体体液中环境激素类污染物通常是以ppt级甚至是ppb级存在，对于监测分析的技术要求较高。现有的人体尿液中环境激素的检测方法往往存在检测速度慢、检测成本高、无法进行批量检测的缺点。

因此，研究开发一种环境激素在人体中暴露水平的检测方法，该方法具有检测速度快、检测成本低，可以进行批量检测的优点，能很好的对环境激素在人体中的暴露水平进行检测，具有非常好的科研和商业应用前景。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种人体尿液中环境激素的检测方法，所述检测方法具有检测速度快、检测成本低，可以进行批量检测的优点，能很好的对环境激素在人体中的暴露水平进行检测。

本发明提供的一种人体尿液中环境激素的检测方法，包括如下步骤：

(1)将人体尿液与含有环境激素同位素内标的内标液混合，随后对混合液依次进行有机溶剂萃取和反相SPE净化得到待测样本；

(2)将所述待测样本通过液质联用检测，得到环境激素的种类和含量。

进一步的，上述内标液是通过将环境激素同位素内标溶于低碳醇溶液并定容制得。

更进一步的，所述低碳醇溶液为甲醇溶液。

进一步的，上述步骤(1)中有机溶剂萃取的溶剂为乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷和叔丁基甲醚中的一种。

更进一步的，所述有机溶剂萃取的溶剂为乙酸乙酯。

进一步的，上述步骤(1)中反相SPE的洗脱溶剂为甲醇。

进一步的，上述步骤(2)具体包括如下步骤：

步骤(a)：称取环境激素标准品，用甲醇溶解，得到不同浓度的标准液；

步骤(b)：称取上述甲醇定容后的内标液，随后将内标液分别加入步骤(a)得到的标准液中，超纯水定容后离心，取上清液作为待测标准液；

步骤(c)：将步骤(b)得到的待测标准液和上述步骤(1)得到的待测样本通过液质联用检测，得到环境激素的种类和含量。

进一步的，上述步骤(c)液质联用检测的液相色谱条件为：

色谱柱为键合相色谱柱，进样量：5～50μL，流动相包括A和B，其中A为乙酸铵水溶液，B为乙腈甲醇混合溶液，流动相的流速为0.1-2.0mL/min；流动相的梯度(以体积百分比计)：

0～3min，A：30～100％、B：70～0％；