[发明专利]一种美味牛肝菌的人工栽培方法

权利要求书

1.一种美味牛肝菌的人工栽培方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.母种分离培养：采集新鲜、壮实、中等成熟的野生子实体，洗净，表面消毒，于无菌条件下切取组织块于母种培养基中培养；

b.菌种扩繁：将步骤a培养所得母种接入含扩繁培养基的容器内振荡培养，振荡频率为10-30rpm/min；

c.淡竹叶无菌苗培育：挑选成熟淡竹叶竹米，去壳消毒冲洗后置于诱导培养基上培养，待诱导出愈伤组织后经继代及转分化培养得淡竹叶再生植株即淡竹叶无菌苗；

d.菌根苗培育及栽培出菇：将扩繁获得的菌球打碎成菌浆，稀释10-50倍，注射入淡竹叶无菌苗后重新栽培直至培养成菌根苗，然后将菌根苗植入覆土菇床中，培养出菇。

2.根据权利要求1所述人工栽培方法，其特征在于，所述方法步骤a的组织块为菌柄、菌盖或菌盖与菌柄交汇处。

3.根据权利要求1所述人工栽培方法，其特征在于，所述方法步骤a的母种培养基为马铃薯160-180g、葡萄糖15-17g、酵母浸出汁1.6-1.8g、维生素B₁26-32ug、水900-1000ml。

4.根据权利要求1所述人工栽培方法，其特征在于，所述方法步骤b的扩繁培养基为暗棕壤4-4.5kg、麦子4-4.5kg、桦树木屑1.5-2.5kg、草炭0.6-1kg、硫酸钾0.1-0.2kg、过磷酸钙0.1-0.2kg、凤尾草提取液3-7ml。

5.根据权利要求4所述人工栽培方法，其特征在于，所述凤尾草提取液的提取方法为将凤尾草粉碎。过40-50目筛，称取粉末40-50g，加入2-4倍体积的70-90％乙醇60-70℃下回流提取3-5次，1.5-2h/次，合并滤液，离心，取上清液，挥干溶剂后为醇提物，将醇提物用无水乙醇溶解，蒸馏水稀释后调节pH至中性，灭菌后4℃保存备用。

6.根据权利要求1-5任一项所述人工栽培方法，其特征在于，所述方法步骤b的覆土菇床中使用的土壤为海泡石矿物粉、灰沙土、暗棕壤以1:2-3:2.5-4的比例混合而成。