[发明专利]一种神经肌肉阻滞剂的分析方法

说明书

一种神经肌肉阻滞剂的分析方法，所述方法包括采用高效液相色谱法进行米库氯铵的分离的步骤，所述高效液相色谱法中，以十八烷基键合硅胶为固定相，检测波长为250～300nm，以流动相A和流动相B进行梯度洗脱，其中，所述的流动相A为水溶液:有机溶剂＝100:0～50:50(v/v)，流动相B为水溶液:有机溶剂＝0:100～50:50(v/v)。本发明方法可以有效分离、检测、定量测定米库氯铵的三种异构体和四种已知杂质以及多种其他的杂质，有利于保证米库氯铵的用药安全性和有效性；而且本发明方法条件温和，对高效液相色谱仪器、分析试剂和色谱柱没有苛刻要求。

技术领域

本发明涉及一种神经肌肉阻滞剂的分析方法。

背景技术

在麻醉中，神经肌肉阻滞剂用于外科手术和气管插管期间提供骨骼肌松弛作用。神经肌肉阻滞剂一般根据作用机制分为去极化和非去极化两类；根据作用持续时间分为短效、中效、长效三类。去极化药物包括琥珀胆碱和癸双胺，由于它们的去极化作用机制，这些药物具有严重的副作用，例如心跳停止和死亡、血钾过多、恶性高温、严重肌肉疼痛、心律失常、增加眼内压和增加胃内紧张等。非去极化神经肌肉阻滞剂包括长效药物例如d-筒箭毒碱、泮库溴铵、弛肌碘、二烯丙基毒马钱碱和毒马钱碱，中效药物例如阿曲库铵和维库溴铵，以及短效药物如米库氯铵。普遍认为非去极化药物比去极化药物更加安全并且临床上更合乎需要。短效药物比长效药物更安全，因为在急诊情况下，药物持续时间极为重要，使用持续时间较长的药物能导致严重的脑损伤和死亡。

米库氯铵是目前最短效的非去极化神经肌肉阻滞剂，于1992年在美国上市，商品名为Mivacron，常用于气管插管和手术中维持肌松。其作用与氯筒箭毒碱相似，临床剂量下无明显蓄积，促使组胺释放作用较小，对颅内压和眼内压无不良影响，易于控制肌松浓度和范围，术后恢复快。米库氯铵能灵活运用于各种手术中，除了一般病人，还可应用于神经肌肉疾患和血钾增高的病人；特别是在小儿手术中很少影响小儿的心血管，被视为琥珀胆碱的替代药。由于米库氯铵具有良好的临床表现，在麻醉手术中得到了越来越多的关注。

米库氯铵属于多手性中心化合物，目前市场上销售的成药是反-反式、顺-反式、顺-顺式三种异构体的混合物，这三种异构体的比例通常为50-60％、34-40％、4-8％。经过分析，米库氯铵成品中还含有四种明显的杂质，即反式季铵醇(杂质A)、顺式季铵醇(杂质B)、反式季铵酯(杂质C)、顺式季铵酯(杂质D)，结构分别如下：

以上四种杂质都是米库氯铵合成过程中的工艺杂质，其中，杂质A和杂质B为米库氯铵合成过程中的重要中间体；杂质C和杂质D为米库氯铵合成过程中的副产物。

从目前公开的文献来看，有关米库氯铵的分析检测方法报道非常少。专利US4761418报道了检测米库氯铵三种异构体和四种主要杂质的色谱分离条件，色谱柱为Whatman Partisil 10w(25cm*4.6mm)，流动相为甲醇-乙酸乙酯-三氟乙酸-硫酸(61.1:38.5:0.3:0.1)。其流动相中含有三氟乙酸和硫酸两种强酸，不仅对检测样品的稳定性会造成影响，而且还会腐蚀检测分析的仪器设备，尽管此类型色谱柱具有一些耐酸性能，但强酸对色谱柱的伤害是显而易见的，会严重缩短色谱柱的寿命并影响方法的耐用性，这样必然会降低实验的重现性、重复性，以及实验结果的可靠性，同时还会增加米库氯铵成品药的研发和生产成本。并且，在此条件下分析检测时，上述七种物质在非常短的时间内全部出峰，仅能达到检测这些特定物质的目的，而不能对其他杂质进行分析检测，其他极性大的杂质无法被分离，而极性小的杂质无法在较短的时间内被洗脱检测，因此无法达到全面、准确地检测米库氯铵成分的要求。

米库氯铵中的杂质能否被全面准确地分析检测，包括潜在杂质的检测在内，直接关系到米库氯铵的质量与安全性，杂质研究是保证药品安全性和质量的前提和关键环节，是药物一致性评价的重要指标。如果色谱条件不能有效检测到潜在杂质的存在和含量，将对用药安全性和有效性带来极大威胁。