[发明专利]一种基于核磁共振技术用于荆条蜜、油菜蜜和洋槐蜜的鉴别方法

说明书

本发明公开了一种基于核磁共振技术用于荆条蜜、油菜蜜和洋槐蜜的鉴别方法，将蜂蜜样品，过滤后用重水配置成0.03‑0.5g/L的溶液；加入浓度为0.5‑2.0 mol/L的磷酸盐缓冲溶液，其中，磷酸盐缓冲溶液中含体积分数为0.05‑0.3%的3‑三甲基硅烷基‑1‑丙基磺酸钠内标溶液和0.1‑3.0 mM的叠氮化钠，混合，调整pH为2.5‑4.0，经核磁共振谱仪测定得到核磁共振谱；分析蜂蜜样品标记物化学位移，¹H化学位移δ为7.0ppm～7.5ppm的偏差△δ在0.02‑0.05ppm范围以内为荆条蜜，否则为油菜蜜或者洋槐蜜。本方法可短时间内分析大量样品，快速鉴别出分荆条蜜与油菜蜜和洋槐蜜。

技术领域

本发明涉及本涉及属于食品检测，更具体涉及一种基于核磁共振技术用于荆条蜜、油菜蜜和洋槐蜜的鉴别方法。

背景技术

蜂蜜国家标准GB14963-2011GB中规定，蜂蜜是一种蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或者蜜露，与自身分泌物混合后，经充分酿造而成的天然甜物质，是一种营养丰富的天然滋养食物。花源有差异，即植物的代谢有差异，因而蜜蜂采得的花蜜成分就会不同，蜂蜜通常根据蜜源植物进行分类，可分为油菜蜜、洋槐蜜、荆条蜜、枣花蜜、椴树蜜等。近年来，国内和国际市场对蜂蜜的需求量不断扩大，然而蜂蜜的产量却难以满足市场需求。由于我国地域辽阔、地形复杂、气候多样，蜂蜜蜜种和产地具有多样化的特性，其产品附加值也产生差异。在巨大经济利益的驱使下，很多不法分子在高品质蜂蜜中加入其它低品质的蜂蜜以次充好，达到以假乱真的效果。严重干扰了蜂蜜产品的市场秩序和我国蜂蜜产品的出口贸易。因此需要开发有效的、可靠的方法来鉴别不同植物源的蜂蜜。

对于蜂蜜蜜种的鉴别，最有效的手段是去发现能够显著区分特定蜜种参数的灵敏、可靠的化学标志物。传统方法主要靠感观鉴别和花粉分析。感官鉴别是通过看、闻、品，发现不同种类蜂蜜在色泽、气味、口感方面存在的一些差异，进而区分鉴别。该方法有很大局限性，主要依赖于检测人员个人的经验；花粉分析是在显微镜下观察蜂蜜中花粉细胞的形态，由于每种蜜源植物的花粉都有自己的特征，因此可鉴别蜂蜜的蜜种。但有些蜜种的蜂蜜花粉相似，该方法很难区分。然而，有关特定标志物的国际标准还未颁布。欧洲理事会发布了确定蜂蜜蜜种鉴别的方法，还包括测定总黄酮、挥发性组分、氨基酸、金属和非金属痕量元素。然而这些方法缺乏灵敏可靠的标志物，对于蜂蜜蜜种的鉴别，其准确性、灵敏度和可靠性都将大大降低。

核磁共振( NMR )是一种非常重要的研究和分析测试工具，在化学、生物、医学等领域中得到广泛应用，具有很多优势：能保持测试对象的完整性，不破坏样本的性质；对样本要求不严苛，可快速处理，重复实验，大大减少了实验的消耗；可同时完成对物质的鉴别和物质含量的测定，高效快速；具有极好的分辨率。本发明运用核磁共振技术筛选出荆条蜜的特征标志物，从而建立了快速区分荆条蜜、油菜蜜和洋槐蜜的方法。

发明内容

本发明提供了：一种基于核磁共振技术用于荆条蜜、油菜蜜和洋槐蜜的鉴别方法，技术可靠，可短时间内分析大量样品，快速鉴别出分荆条蜜与油菜蜜和洋槐蜜，避免了主观因素、人为误差的影响，准确性高、结论科学可靠。

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案是这样的，一种基于核磁共振技术用于荆条蜜、油菜蜜和洋槐蜜的鉴别方法，包括如下步骤，

1）将搅拌均匀的蜂蜜样品，滤布过滤，除去蜂蜜中固体杂质后，用重水配置成0.03-0.5g/L的溶液；所述的蜂蜜样品为荆条蜜、油菜蜜和洋槐蜜；

2）取一定体积的上述溶液，加入浓度为0.5-2.0 mol/L的磷酸盐缓冲溶液，两者的体积比为800-1500：100-300，其中，磷酸盐缓冲溶液中含体积分数为0.05-0.3%的3-三甲基硅烷基-1-丙基磺酸钠内标溶液和0.1-3.0 mM的叠氮化钠，涡旋振荡至均匀混合，调整最终溶液的pH值为2.5-4.0，置于核磁管中；