[发明专利]大肠癌相关的miRNA作为生物标志物的应用及大肠癌检测试剂盒

说明书

本发明涉及一种大肠癌相关的miRNA作为生物标志物的应用及大肠癌检测试剂盒。hsa‑miR‑92a‑1‑5p、hsa‑miR‑125b‑5p和hsa‑miR‑218‑5p的表达量高低与大肠癌存在密切的关联性，因此，hsa‑miR‑92a‑1‑5p、hsa‑miR‑125b‑5p和hsa‑miR‑218‑5p能够作为大肠癌的生物标志物应用在制备大肠癌检测试剂、大肠癌检测试剂盒或大肠癌检测装置中。基于上述生物标志物研发的大肠癌检测试剂，对大肠癌的检测具有较高的敏感度和较强的特异性，有利于大肠癌的筛查和早期诊断。

技术领域

本发明涉及分子诊断领域，特别是涉及一种大肠癌相关的miRNA作为生物标志物的应用及大肠癌的检测试剂盒。

背景技术

大肠癌(Colorectal cancer，CRC)是由大肠粘膜上皮起源的恶性肿瘤，为常见的消化道恶性肿瘤，包括结肠癌和直肠癌(都是大肠的一部分)。大肠癌是世界上第三大肿瘤，其年新发病例大约为一百万，年死亡人数超过五十万。近年来，由于我国人民生活方式、饮食结构、环境因素等的改变，大肠癌的发病率及死亡率呈逐年上升趋势。

大肠癌诊断主要有三类：X线检查、乙状结肠镜和纤维结肠镜检查以及癌胚抗原(CEA)试验。X线检查是诊断大肠癌的有效手段，但对于直径小于2cm的早期癌显示常有困难。癌胚抗原试验由于特异性、敏感性有限，对早期病例的诊断价值也不大。乙状结肠镜和纤维结肠镜检查虽然准确性高，但乙状结肠镜和纤维结肠镜检均具有一定的痛苦，患者难以接受，且乙状结肠镜和纤维结肠镜检均对早期的大肠癌不敏感。随着人体基因组测序完成及高通量测序技术的高速发展，基因筛查成为大肠癌诊断的方向。其中，癌胚抗原(CEA)对大肠癌的检测缺乏特异性及敏感度，不利于对早期大肠癌的诊断。

MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为18～25个核苷酸的非编码单链RNA分子，miRNA能够与靶基因mRNA的3’端完全或部分匹配互补结合，导致靶mRNA降解或抑制其翻译从而调控靶基因的表达。

然而，传统的大肠癌的检测试剂或试剂盒特异性和敏感度较低，需要同时检测大量的miRNA，才能得到初步的判断，操作相对比较复杂，工作量较大。

发明内容

基于此，有必提供一种具有较高特异性和较高敏感度且操作简单的大肠癌检测试剂盒。

此外，还提供一种大肠癌相关的miRNA作为生物标志物的应用。

hsa-miR-92a-1-5p、hsa-miR-125b-5p和hsa-miR-218-5p作为生物标志物在制备大肠癌检测试剂、大肠癌检测试剂盒或大肠癌检测装置中的应用。

hsa-miR-92a-1-5p、hsa-miR-125b-5p和hsa-miR-218-5p均属于miRNA。发明人在大肠癌的生物标志物方面进行了大量的探索，预料不到地发现，hsa-miR-92a-1-5p、hsa-miR-125b-5p和hsa-miR-218-5p在大肠癌病人和健康人的体内的表达差异较大，hsa-miR-92a-1-5p、hsa-miR-125b-5p和hsa-miR-218-5p的表达量与大肠癌具有较高相关性，且hsa-miR-92a-1-5p、hsa-miR-125b-5p和hsa-miR-218-5p在体外很稳定，因此，能够作为生物标志物应用于制备大肠癌检测试剂、大肠癌检测试剂盒或大肠癌检测装置中。经实验验证，通过基于上述生物标志物研发的大肠癌检测试剂盒对hsa-miR-92a-1-5p、hsa-miR-125b-5p和hsa-miR-218-5p的联合检测，得到的结果对大肠癌的检测具有较高的敏感度和特异性，能够应用于大肠癌的筛查和早期诊断。此外，过基于上述生物标志物研发的大肠癌检测试剂盒仅需要对hsa-miR-92a-1-5p、hsa-miR-125b-5p和hsa-miR-218-5p三个miRNA进行检测，即可得到对大肠癌的检测具有较高的敏感度和特异性的结果，操作简单且方便，工作量小。