[发明专利]一种番木瓜几丁质酶及其制备方法和应用有效
申请号: | 201710749572.3 | 申请日: | 2017-08-28 |
公开(公告)号: | CN107488650B | 公开(公告)日: | 2020-08-04 |
发明(设计)人: | 杜昱光;程功;任立世;焦思明;冯翠 | 申请(专利权)人: | 济宁中科恩吉科创新产业园管理有限公司 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/81;C12P19/04;C12P19/12 |
代理公司: | 北京方安思达知识产权代理有限公司 11472 | 代理人: | 陈琳琳;武玥 |
地址: | 272400 山东省济宁市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 番木瓜 几丁质 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种包含番木瓜几丁质酶基因的重组表达载体,其特征在于:所述番木瓜几丁质酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;所述表达载体为pGBG1,表达载体pGBG1通过如下方式获得:
将表达载体pPIC9中的信号肽序列如SEQ ID NO.4所示进行密码子优化,获得适合在毕赤酵母中表达的信号肽序列如SEQ ID NO.5所示;
利用Nsi I/Xho I双酶切,将表达载体pPIC9中如SEQ ID NO.4所示的序列替换为如SEQID NO.5所示的信号肽序列,得到表达载体pGBG1。
2.一种番木瓜几丁质酶的制备方法,该方法为:将权利要求1所述的重组表达载体导入毕赤酵母细胞,诱导并获得分泌表达的番木瓜几丁质酶;所述番木瓜几丁质酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于:所述毕赤酵母为GS115。
4.权利要求1所述的包含番木瓜几丁质酶基因的重组表达载体在壳聚糖降解中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:经由权利要求1所述的包含番木瓜几丁质酶基因的重组表达载体所制备的番木瓜几丁质酶单独用于壳聚糖降解制备获得壳寡糖;或者经由权利要求1所述的包含番木瓜几丁质酶基因的重组表达载体所制备的番木瓜几丁质酶与其他几丁质酶或壳聚糖酶混合使用,协同降解壳聚糖或几丁质。
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