[发明专利]一种将miRNA从石墨烯上解吸附的方法有效
| 申请号： | 201710756474.2 | 申请日： | 2017-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN107447011B | 公开（公告）日： | 2020-08-04 |
| 发明（设计）人： | 闫赫;邢婉丽 | 申请（专利权）人： | 博奥生物集团有限公司;清华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 刘猛;赵青朵 |
| 地址： | 102206 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 mirna 石墨 解吸 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种将miRNA从石墨烯上解吸附的方法，其特征在于，将吸附有miRNA的还原氧化石墨烯直接进行原位反转录，将miRNA解吸附下来；所述原位反转录的体系为：
8-16μL原位反转录buffer、1-5μL反转录酶、余量水，共20μL；
其中，所述反转录酶为两种酶组分，一种为E.coli Poly(A)polymerase,另一种为RTase。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述原位反转录的体系为：
10μL原位反转录buffer、2μL反转录酶、8μL水，共20μL。
3.根据权利要求1-2任意一项所述方法，其特征在于，所述原位反转录在42℃下进行1小时。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述还原氧化石墨烯为磁性还原氧化石墨烯。
5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述磁性还原氧化石墨烯通过将还原氧化石墨烯修饰到磁珠上获得。
6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述miRNA为miRNA let-7a。
7.原位反转录在将miRNA从还原氧化石墨烯上解吸附中的应用；所述原位反转录的体系为：
8-16μL原位反转录buffer、1-5μL反转录酶、余量水，共20μL；
其中，所述反转录酶为两种酶组分，一种为E.coli Poly(A)polymerase,另一种为RTase。
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