[发明专利]一种牛樟芝菌丝体的培养方法在审
申请号: | 201710757396.8 | 申请日: | 2017-08-29 |
公开(公告)号: | CN107586724A | 公开(公告)日: | 2018-01-16 |
发明(设计)人: | 殷东林;梁仿世 | 申请(专利权)人: | 殷东林;梁仿世 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/645 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司11385 | 代理人: | 董芙蓉 |
地址: | 464000 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种牛 菌丝体 培养 方法 | ||
1.一种牛樟芝菌丝体的培养方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
将牛樟芝菌种接种在斜面培养基上进行活化与提纯,得到活化好的母种;
将所述活化好的母种接种到液体摇瓶培养基中进行静置培养,待菌丝萌发且无污染后进行搅拌培养,获得摇瓶种;
将所述摇瓶种接种到发酵培养基上进行发酵培养,得到发酵菌丝体;
将所述发酵菌丝体作为液体菌种接种到人工合成固体培养基质上并发酵培养30-90天,得到牛樟芝菌丝体。
2.根据权利要求1所述的一种牛樟芝菌丝体的培养方法,其特征在于,所述斜面培养基由以下原料组成:马铃薯100g/L-200g/L、葡萄糖10g/L-20g/L、玉米粉10g/L-50g/L、蛋白胨2g/L-5g/L、硫酸镁0.1g/L-1g/L、磷酸二氢钾0.2g/L-2g/L、VB110g/L-50mg/L、琼脂粉16g/L-20g/L;所述将牛樟芝菌种接种在斜面培养基上进行活化与提纯的培养温度为25℃-30℃。
3.根据权利要求1所述的一种牛樟芝菌丝体的培养方法,其特征在于,所述摇瓶培养的培养温度为25℃-33℃,所述摇瓶培养为静置培养3-4天;所述搅拌培养是将摇瓶放置于磁力搅拌器上进行培养,所述搅拌培养的培养温度为25℃-33℃,所述搅拌培养的培养时间为6-10天。
4.根据权利要求1所述的一种牛樟芝菌丝体的培养方法,其特征在于,所述液体摇瓶培养基由以下原料组成:马铃薯汁10g/100mL-50g/100mL、葡萄糖1g/100mL-4g/100mL、玉米粉1g/100mL-5g/100mL、蛋白胨0.2g/100mL-1g/100mL、硫酸镁0.01g/100mL-0.1g/100mL、磷酸二氢钾0.02g/100mL-0.2g/100mL、VB1 0.001g/100mL-0.01g/100mL及琼脂粉0.01g/100mL-0.2g/100mL。
5.根据权利要求1所述的一种牛樟芝菌丝体的培养方法,其特征在于,所述发酵培养是在发酵罐中进行,所述发酵罐的罐压为0.02Mpa-0.08Mpa;所述发酵培养的通气量为1:0.2-2.0;所述发酵培养的接种量为1%-10%,所述发酵培养的培养温度为25℃-33℃,所述发酵培养的培养时间为3-13天。
6.根据权利要求1所述的一种牛樟芝菌丝体的培养方法,其特征在于,所述发酵培养基由以下原料组成:马铃薯汁10g/100mL-50g/100mL、葡萄糖1g/100mL-4g/100mL、玉米粉1g/100mL-5g/100mL、蛋白胨0.2g/100mL-1g/100mL、硫酸镁0.01g/100mL-0.1g/100mL、磷酸二氢钾0.02g/100mL-0.2g/100mL、VB1 0.001g/100mL-0.01g/100mL、琼脂粉0.01g/100mL-0.2g/100mL。
7.根据权利要求1所述的一种牛樟芝菌丝体的培养方法,其特征在于,将所述发酵菌丝体作为液体菌种接种到人工合成固体培养基质上并发酵培养30-90天得到樟芝菌丝体的具体步骤包括:
配制固体培养基质:按以下配方准备各原料:小麦42%-98.7%、石膏0.1%-5%、白糖0.1%-3%、黄豆粉0.1%-20%、香樟木屑1%-30%;将饱满的干小麦浸泡洗净后煮到熟而不烂,晾晒沥干水,分别将石膏、白糖、黄豆粉和香樟木屑放入小麦里混合得到所述固体培养基质;
灭菌:对所述固体培养基质进行高压蒸汽灭菌;
接种:将灭菌后的固体培养基质冷却至常温,再将所述发酵菌丝体作为液体菌种接种到常温的固体培养基质上;
发酵培养:将接种后的固体培养基质置于黑暗环境中发酵培养30-90天,即得到樟芝菌丝体。
8.根据权利要求7所述的一种牛樟芝菌丝体的培养方法,其特征在于,所述固体培养基质的含水量为50%-60%;所述灭菌的压力为0.1Mpa-0.15Mpa,所述灭菌的温度为121℃-130℃,所述灭菌的时间为1.5h-2.5h;所述发酵菌丝体作为液体菌种接种到常温的固体培养基质上的接种量为1%-10%;所述固体培养基质在黑暗环境中的发酵温度为25℃-33℃,发酵湿度为30%-60%,培养环境中每天通风1-3次,每次10-30分钟。
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