[发明专利]重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽、腺病毒亚单位疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种腺病毒亚单位疫苗，其特征在于，所述疫苗包含重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽；所述重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽为SEQ ID No:2所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的腺病毒亚单位疫苗，其特征在于，所述重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽的制备方法，包括以下步骤：

(1)、以人11型腺病毒基因组为模板，SEQ ID No:15~16为引物对进行PCR扩增得到11型knob基因，BamHI和HindIII双酶切PCR片段后连接到原核表达载体PQE30中；

(2)、转化大肠杆菌Top10化学感受态，挑取单菌落进行基因测序，取与理论序列一致无突变的菌落保种并提取质粒；

(3)、将鉴定正确的表达质粒转化表达菌BL21感受态，挑单菌落接种至含Amp的LB培养基摇培，加IPTG诱导，离心收集菌体；

(4)、用PBS缓冲液重悬菌体，溶菌酶或超声波裂解细菌，高速离心后取上清，用镍柱进行纯化，梯度咪唑进行洗涤和洗脱，洗脱液去除咪唑，即得重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽。

3.根据权利要求1所述的腺病毒亚单位疫苗，其特征在于，所述疫苗还包括磷酸铝凝胶佐剂，所述重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽与所述磷酸铝凝胶佐剂以相同体积配比。

4.一种多价腺病毒亚单位疫苗，其特征在于，所述疫苗包含重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽，所述重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽为SEQ ID No:2所示的氨基酸序列或所述重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽由如SEQ ID No:1所示的碱基序列所编码。

5.根据权利要求4所述的多价腺病毒亚单位疫苗，其特征在于，所述疫苗

还包括磷酸铝凝胶佐剂，所述重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽与所述磷酸铝凝胶佐剂以相同体积配比。

6.一种编码权利要求1所述的重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽的核酸，其特征在于，所述核酸的碱基序列如SEQ ID No:1所示。

7.一种多价腺病毒亚单位疫苗，其特征在于，所述疫苗包含如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列表达的或如SEQ ID No:1所示的碱基序列所编码的腺病毒纤毛蛋白肽、以及SEQ IDNo:4所示氨基酸序列的重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽。

8.一种多价腺病毒亚单位疫苗，其特征在于，所述疫苗包含如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列表达的或如SEQ ID No:1所示的碱基序列所编码的腺病毒纤毛蛋白肽、SEQ ID No:4所示氨基酸序列的重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽、以及SEQ ID No:6所示氨基酸序列的重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽。