[发明专利]重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽、腺病毒亚单位疫苗及其制备方法

说明书

本发明公开了一种重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽、腺病毒亚单位疫苗及其制备方法，所述重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽具有如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列，所述疫苗包含上述腺病毒纤毛蛋白肽。本发明的腺病毒纤毛蛋白肽表达量高、免疫小鼠可以诱导高滴度中和抗体，免疫原性强，可以作为腺病毒亚单位疫苗候选，生产和纯化方便、成本低；可以诱导交叉中和作用抗体，可以作为多价腺病毒疫苗候选；和其他型别knob配伍也可作为一种多价腺病毒亚单位疫苗候选；可作为制备广谱中和活性单克隆抗体或人源单抗的免疫抗原和检测抗原。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，更具体地，本发明涉及一种重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽、腺病毒亚单位疫苗、多价腺病毒亚单位疫苗及其制备方法。

背景技术

人腺病毒(human Adenovirus,HAdV)可以感染多种粘膜组织，如胃肠道、呼吸道、泌尿生殖道及眼角结膜等，导致急性呼吸道感染(ARI)、急性胃肠炎、肾炎、眼角膜结膜炎、膀胱炎等自限性的粘膜感染甚至严重的致死性感染。腺病毒流行广泛，传播快，近年来在多个国家和地区时有爆发和流行，严重威胁到社会公共卫生安全。各个年龄段人群均能被腺病毒感染，其中易感人群多为婴幼儿和免疫功能受损的患者(如骨髓移植、人类免疫缺陷病毒感染)，常可引起严重甚至致死性感染；军队中腺病毒是致发热性呼吸道疾病的重要病原体。HAdV暴发感染多发生在幼儿园、新兵营等封闭或拥挤的场所，大规模流行中其所致的重症肺炎病死率较高，甚至未经治疗的重症HAdV肺炎或弥散性疾病的死亡率可能超过50％。腺病毒引起的肺炎尤为严重，不仅可以引起心力衰竭、呼吸衰竭，还可以引起肺外受累，如脑炎、肝损害、心肌炎或心肌损害等，甚至导致死亡，而且通常预后较差。

至今已发现的人腺病毒有7组50多种血清型，超过69种基因型。腺病毒是致病毒性肺炎的主要病原体之一，B组、C组、E组腺病毒都可以引起呼吸道感染，其中人B组腺病毒的3型、7型、14型、55型和E组4型腺病毒是致急性呼吸道感染(ARI)和婴幼儿致死性肺炎的重要病原体，传染性强，常导致爆发流行，在国内外多有报道。国内流行毒株主要型别为3型和7型，近年高致病力毒株HAdV-B55在全国多个省份的军队和群众中已有多起爆发流行，已经成为国内导致肺炎的主要病原体之一。

在致婴幼儿和成人急性呼吸道感染ARI的腺病毒中，人腺病毒B组3型、7型、14型和55型是最重要的几个型别。其中3型腺病毒主要导致婴幼儿严重感染，一般不导致成年人严重感染。相对其它型别的腺病毒感染，B组人7型腺病毒(HAdV-B7)、人55型(HAdV-B55)感染引起的肺炎症状通常更严重。国内从60年代以来一直有HAdV-B7重症感染和爆发流行的报道。近年来新出现的HAdV-B55腺病毒导致的呼吸道感染和严重肺炎暴发流行的报道越来越多，在全国范围内在人群密集的军营和高校已有多起爆发流行，已经成为重要的流行病毒株，引起人们更多重视。人腺病毒14型(HAdV-B14)引起的幼儿和成人急性呼吸道感染在国内外都有过爆发病例报道，并且常常导致重症肺炎，特别是近年来出现的高致病的HAdV-14p1株的流行严重威胁公众健康。HAdV-B55是一种基因组重组的腺病毒，其基因组包括纤毛基因主要来自14型腺病毒，只有六邻体高变区来源于人11型腺病毒，这种重组变异导致其不能被HAdV-B14抗血清中和。重组是腺病毒进化的主要方式，重组可能产生生物学特性改变的新型腺病毒，出现更强致病性或更强传染性的新毒株，将会严重威胁人类健康。

腺病毒致病的广泛性和危害的严重性使得腺病毒的防治显得十分重要，目前在世界范围内还没有针对腺病毒特异有效的治疗药物，其治疗主要采取对症治疗，接种腺病毒亚单位疫苗是预防腺病毒感染最有效的方法之一。因此，有必要研制一种多价腺病毒亚单位疫苗，可以预防常见的腺病毒型别感染，并且要适合普通人群特别是婴幼儿使用。