[发明专利]多索茶碱原料药中基因毒性杂质的检测方法

说明书

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及多索茶碱原料药中基因毒性杂质的检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱法进行测定，具体检测方法如下：色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键和硅胶，流动相为水和乙腈的混合溶剂梯度洗脱，柱温为25～35℃，流动相流速为0.5～1.5mL/min，检测波长为210～230nm；多索茶碱原料药配制成5～15mg/mL的溶液；进样量为30～60μL，记录色谱图。本发明提供的检测方法可以有效的分离出多索茶碱原料药中的基因毒性杂质峰，该方法极大的提高了基因毒性杂质的检测灵敏度，可简单、快速、稳定的检测出多索茶碱原料药基因毒性杂质。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及多索茶碱原料药中基因毒性杂质的检测方法。

背景技术

多索茶碱是甲基黄嘌呤的衍生物。英文名称Doxofylline，化学名称1,3-二甲基-7-(1,3-二氧环戊基-2-基)甲基-3,7-二氢-1H-嘌呤-2,6-二酮，分子式为C11H14N4O4，分子量为266.25，化学结构式：

多索茶碱是甲基黄嘌呤的衍生物，它是一种支气管扩张剂，可直接作用于支气管，通过抑制平滑肌细胞内的磷酸二酯酶发挥松弛支气管平滑肌、抑制哮喘的作用。多索茶碱松弛支气管平滑肌痉挛的作用较氨茶碱强10-15倍，并具有茶碱所没有的镇咳作用。多索茶碱无腺苷受体阻断作用，故与茶碱相比，较少引起中枢、胃肠道及心血管等肺外系统的不良反应，但大剂量给药仍可引起血压下降等。另外，体内外研究证实本药还具有抑制血小板活化因子(PAF)诱导的支气管收缩以及继发的血栓素A2生成的作用。在大鼠体内研究中发现本药可抑制PAF诱导的胸膜炎及渗出，还可抑制白三烯C4的生成。因此多索茶碱的有效性和安全性更高，临床应用价值更大。

多索茶碱在合成过程中使用到对甲苯磺酸和乙二醇，有可能会反应生成对甲苯磺酸乙二酯和对甲苯磺酸二乙酯。该结构含有对甲苯磺酸酯，为潜在基因毒性杂质。根据该药制剂的用法用量，上述基因毒性杂质限度在2ppm，一般液相方法分离度和灵敏度难以达到要求。目前尚未发现有关多索茶碱原料药中基因毒性杂质检测的文献报道。

因此，亟需开发一种合理的色谱系统，制定出简单、灵敏的多索茶碱原料药中基因毒性杂质的检测方法，以便控制多索茶碱原料药的质量。

发明内容

为了解决现有技术中存在的缺少多索茶碱原料药中基因毒性杂质检测方法的问题，本发明提供了一种多索茶碱原料药中基因毒性杂质的检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱法进行测定，具体检测方法如下：

(1)色谱条件

填充剂为十八烷基硅烷键和硅胶，

流动相为水和乙腈的混合溶剂，梯度洗脱，

柱温为25～35℃，

流动相流速为0.5～1.5mL/min，

检测波长为210～230nm；

(2)样品配制

称取多索茶碱原料药，用水和乙腈的混合溶剂配制成含多索茶碱浓度为5～15mg/mL的溶液；

(3)检测方法

精密量取供试品溶液30～60μL，注入高效液相色谱仪中，记录色谱图。

进一步地，本发明所述的多索茶碱原料药中基因毒性杂质的检测方法，步骤(1)色谱条件中流动相水和乙腈的体积比为70：30～75：25。