[发明专利]一种盐酸阿莫罗芬及其干扰物的测定方法

权利要求书

1.一种盐酸阿莫罗芬及其干扰物的测定方法，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备：称取盐酸阿莫罗芬乳膏样品，加入含磷酸的甲醇溶液混合后，超声提取、冷却、定容，再摇匀、冷冻离心、过滤，取续滤液作为供试品溶液；

2)对照品溶液的制备：取盐酸阿莫罗芬、干扰物Ⅰ、干扰物Ⅱ的对照品，加入溶剂溶解并定容，摇匀，得到对照品溶液，其中，

所述干扰物Ⅰ为4-[3-[4-(1,1-dimethylpropyl)-phenyl]-2-methylpropyl]-2,6-dimethylmorpholine 4-oxide，

所述干扰物Ⅱ为N-[2-(acetyloxy)propyl]-N-[3-[4-(1,1-dimethylpropyl)phenyl]-2-methylpropyl]-formamide；

3)检测：采用高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图进行比较，根据相对保留时间和色谱峰面积，确定供试品溶液中盐酸阿莫罗芬、干扰物Ⅰ、干扰物Ⅱ成分的含量

步骤1)中，所述盐酸阿莫罗芬乳膏样品加入的质量g，与含磷酸的甲醇溶液加入的体积ml之比为3:14～3:16；所述含磷酸的甲醇溶液为含体积百分比0.4～0.6％磷酸的甲醇溶液；

所述超声提取的条件为：超声温度为45～55℃，超声时间为10～20min；

所述冷冻离心的条件为：离心温度：-5～0℃；离心时间为15～30min；离心转速为8000～14000rpm；

步骤3)中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱，

250mm×4.6mm，5μm；检测波长：210nm～220nm；流速：0.8～1.2ml/min；流动相：铵盐甲醇水溶液-甲醇，其中，A相为0.55～3g/L铵盐水溶液-甲醇，铵盐水溶液中盐酸调节pH值至2.5～3.5，铵盐水溶液与甲醇的体积比为55:45～65:35，B相为甲醇；分析时间：30min；

梯度洗脱；

所述梯度洗脱的具体程序为：

0-5min，A相：B相体积比为55：45-55：45；

5-12min，A相：B相体积比为55：45-50：50；

12-24min，A相：B相体积比为50：50-15：85；

24-25min，A相：B相体积比为15：85-55：45；

25-30min，A相：B相体积比为55：45-55：45。

2.根据权利要求1所述的一种盐酸阿莫罗芬及其干扰物的测定方法，其特征在于，步骤1)中，所述混合是采用涡旋仪进行振荡摇晃15～25min。

3.根据权利要求1所述的一种盐酸阿莫罗芬及其干扰物的测定方法，其特征在于，步骤2)中，所述对照品溶液的制备，包括以下步骤：

A)取盐酸阿莫罗芬对照品，加入溶剂溶解并定容，配制盐酸阿莫罗芬储备溶液；

B)分别取干扰物Ⅰ对照品和干扰物Ⅱ对照品，加入溶剂溶解并定容，配制干扰物Ⅰ和干扰物Ⅱ的混合储备溶液；

C)再取步骤A)中的盐酸阿莫罗芬储备溶液、步骤B)中的干扰物Ⅰ和干扰物Ⅱ的混合储备溶液，加入甲醇水溶液溶解并定容，配制为对照品溶液。

4.根据权利要求3所述的一种盐酸阿莫罗芬及其干扰物的测定方法，其特征在于，步骤A)或B)中，所述溶剂为铵盐甲醇水溶液与甲醇的混合溶液；所述铵盐甲醇水溶液与甲醇加入的体积之比为1:3～1:5。

5.根据权利要求4所述的一种盐酸阿莫罗芬及其干扰物的测定方法，其特征在于，所述铵盐甲醇水溶液，还包括以下条件中任一项或多项：

B1)所述铵盐甲醇水溶液中的铵盐选自磷酸氢二铵、磷酸二氢铵、三乙胺、碳酸铵或碳酸氢铵中的一种或几种；

B2)所述铵盐甲醇水溶液中铵盐水溶液的浓度为0.55～3g/L；

B3)所述铵盐甲醇水溶液中铵盐水溶液的pH值为2.5～3.5；

B4)所述铵盐甲醇水溶液中，铵盐水溶液与甲醇加入的体积之比为55:45～65:35。