[发明专利]婴幼儿食品及奶粉中低聚半乳糖含量离子色谱法测定方法在审
| 申请号： | 201710786545.3 | 申请日： | 2017-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN107462660A | 公开（公告）日： | 2017-12-12 |
| 发明（设计）人： | 张凤霞;吴玉平;董立雅;舒宁媛;徐娟 | 申请（专利权）人： | 中检科（北京）测试技术有限公司;中国检验检疫科学研究院综合检测中心 |
| 主分类号： | G01N30/96 | 分类号： | G01N30/96 |
| 代理公司： | 北京格旭知识产权代理事务所(普通合伙)11443 | 代理人： | 雒纯丹 |
| 地址： | 100123 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 婴幼儿 食品 奶粉 中低聚 半乳糖 含量 离子 色谱 测定 方法 | ||
1.一种含低聚半乳糖制品中低聚半乳糖含量的测定方法，该方法包括：
(1)将含低聚半乳糖的溶液与淀粉酶接触，得到第一溶液；
(2)将等量的两份第一溶液，分别与β-半乳糖苷酶溶液和磷酸盐缓冲液接触，得到第二溶液和第三溶液；
(3)在第二溶液和第三溶液中分别加入乙腈，过滤，然后将第二溶液和第三溶液冷却处理；
(4)将步骤(3)冷却处理后的第二溶液和第三溶液稀释，得到稀释液A和稀释液B；以及
(5)采用离子色谱法测试稀释液A中的半乳糖浓度，稀释液B中的乳糖浓度和半乳糖浓度，得到低聚半乳糖的含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，将骤(3)冷却处理后的第二溶液和第三溶液稀释至半乳糖和/或乳糖的线性区间是0.5～20μg/mL，然后0.20-0.30μm滤膜过滤，优选采用0.22μm滤膜过滤。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述离子色谱法，流动相：A为H2O，B为100mM NaOH，C为100mM NaOH+500mM NaHAC；
梯度洗脱条件为：0-37min，A：B：C＝90:10：0；37-42min，A：B：C＝0:0：100；42-67min，A：B：C＝90:10：0。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，将含低聚半乳糖的溶液与淀粉酶在40-80℃，优选60℃水浴振荡25-60分钟，优选30分钟，然后冷却；其中，淀粉酶的用量为：8-9g/L，优选8.33g/L。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的pH值为5.5-6.5，优选pH值为6，磷酸盐缓冲液浓度为0.2mol/l。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述β-半乳糖苷酶溶液为含有β-半乳糖苷酶溶液的磷酸盐缓冲液，其中β-半乳糖苷酶含量为12-17g/100ml磷酸盐缓冲液，优选β-半乳糖苷酶含量15g/100ml磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述β-半乳糖苷酶溶液与第一溶液的体积比用量为10:0.6，所述磷酸盐缓冲液与第一溶液的体积比用量为10:0.6。
8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，将等量的两份第一溶液，分别与β-半乳糖苷酶溶液和磷酸盐缓冲液，50-70℃水浴振荡60-90分钟，优选60℃水浴震荡60分钟，然后100℃沸水浴8-20min，优选10min。
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