[发明专利]一种松针黄酮组装抗癌药物、制备方法及应用

权利要求书

1.一种松针黄酮组装抗癌药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，制备松针黄酮；

将新鲜松针晾干或干燥，粉碎得到松针粉；向松针粉中加入相当于松针粉20-30倍质量的75％乙醇，85℃回流提取3次，其中每次回流提取1h，合并3次提取液，过滤得总提取液；将总提取液在0.08MPa旋转蒸发，浓缩得到相对密度1.10的浸膏；向浸膏中加入相当于浸膏5倍质量的水，40KHz、50℃超声溶解，4000r/min离心分离，收集得到黄酮提取液；用大孔树脂HPD450提纯黄酮提取液，收集的洗脱液经减压旋蒸浓缩、干燥得松针黄酮；

S2，制备氧化石墨烯；

S3，组装松针黄酮-叶酸-氧化石墨烯纳米药物

S31，组装Fe₃O₄-氧化石墨烯

将氧化石墨烯、三甘醇和0.50mol/L乙酰丙酮铁溶液按照25mg:6ml:3mL的比例混合，超声，N₂保护下回流反应；然后向反应物中加入无水乙醇，无水乙醇与乙酰丙酮铁溶液的体积比例为20:3，磁性分离出沉淀物；然后以乙醇洗涤沉淀物，烘干，得Fe₃O₄-氧化石墨烯；

S32，组装叶酸-Fe₃O₄-氧化石墨烯

将Fe₃O₄-氧化石墨烯、蒸馏水、NaOH和NaClO按照25mg:25mL:1g:1g的比例混合，超声1-2h；以1mol/L的稀盐酸中和，离心，收集上层液；以蒸馏水和截留分子量2000Da的透析袋透析上层液20-24h，收集透析袋内的透析液；按照0.1g:20mL的比例将叶酸加入透析液中，超声，加入氮-羟基琥珀酰亚胺和1-乙基-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺，超声0.5-1h，得到叶酸-Fe₃O₄-氧化石墨烯粗品溶液，其中氮-羟基琥珀酰亚胺、1-乙基-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺与叶酸的质量比例为100:50:30；

将叶酸-Fe₃O₄-氧化石墨烯粗品溶液用1mol/L的NaHCO₃溶液和截留分子量2000Da的透析袋透析24h，收集透析袋内透析液，离心，收集沉淀，以丙酮洗涤沉淀，干燥，得到叶酸-Fe₃O₄-氧化石墨烯；

S33，组装松针黄酮-叶酸-氧化石墨烯纳米药物

将叶酸-Fe₃O₄-氧化石墨烯分散在磷酸盐缓冲液中，加入2mg/ml的松针黄酮溶液，避光搅拌20-24h，离心，收集下层溶液，干燥，得到松针黄酮-叶酸-氧化石墨烯纳米药物，该松针黄酮-叶酸-氧化石墨烯纳米药物即为松针黄酮组装抗癌药物。

2.根据权利要求1所述的松针黄酮组装抗癌药物的制备方法，其特征在于，S31中，超声的条件为600W、40-50℃超声3-5min；烘干温度为70℃。

3.根据权利要求1所述的松针黄酮组装抗癌药物的制备方法，其特征在于，S32中，离心的条件6000r/min离心4min；干燥条件为40℃下真空干燥48h。

4.根据权利要求1所述的松针黄酮组装抗癌药物的制备方法，其特征在于，S33中，磷酸盐缓冲液为0.1mol/LpH6.86的磷酸盐缓冲液。

5.根据权利要求4所述的松针黄酮组装抗癌药物的制备方法，其特征在于，S33中，叶酸-Fe₃O₄-氧化石墨烯、磷酸盐缓冲液、2mg/ml的松针黄酮溶液的比例为0.05g:20mL:1mL。

6.根据权利要求1所述的制备方法制备而成的松针黄酮组装抗癌药物。

7.根据权利要求1所述的松针黄酮组装抗癌药物的制备方法在制备抗胃癌药物、抗肝癌细胞药物、抗乳腺癌细胞药物或者抗肺癌细胞药物中的应用。

8.根据权利要求6所述的松针黄酮组装抗癌药物制备抗胃癌药物、抗肝癌细胞药物、抗乳腺癌细胞药物或者抗肺癌细胞药物中的应用。