[发明专利]一种提高羔羊体外胚胎发育能力的方法

权利要求书

1.一种促进羔羊卵子体外成熟的方法，为将4-8周龄离体羔羊的卵母卵丘细胞复合体在添加成年羊卵泡液的促卵子成熟培养液中进行体外成熟培养，实现促进羔羊卵子体外成熟；

所述添加成年羊卵泡液的促卵子成熟培养液中，所述成年羊卵泡液的体积百分浓度为20％；

所述成年羊卵泡液为离体成年羊卵泡液；

所述离体成年羊卵泡液来源于激素诱导成年羊或非激素诱导成年羊；

所述添加成年羊卵泡液的促卵子成熟培养液由TCM199溶液、发情羊血清、FSH、LH、17β-estradiol、streptomycin、penicillin和所述成年羊卵泡液组成；

所述发情羊血清在所述促卵子成熟培养液中的体积百分含量为20％；

所述FSH在所述促卵子成熟培养液中的浓度为10μg/mL；

所述LH在所述促卵子成熟培养液中的浓度为10μg/mL；

所述17β-estradiol在所述促卵子成熟培养液中的浓度为1μg/mL；

所述streptomycin在所述促卵子成熟培养液中的浓度为100μg/mL；

所述penicillin在所述促卵子成熟培养液中的浓度为100IU/mL；

所述成年羊卵泡液在所述促卵子成熟培养液中的体积百分含量为20％；

所述体外成熟培养的条件为38.5℃，5％CO₂，95％空气饱和湿度、时间为24h；

或所述羊为绵羊或山羊。

2.一种促进羔羊卵子体外成熟的试剂盒，包括权利要求1所述方法中的所述添加成年羊卵泡液的促卵子成熟培养液。

3.权利要求1所述方法或权利要求2所述试剂盒在提高羔羊体外胚胎的发育能力中的应用。

4.一种提高羔羊体外胚胎的发育能力的方法，包括如下步骤：

1)权利要求1所述方法步骤，得到成熟培养后卵母卵丘细胞复合体；

2)从所述成熟培养后卵母卵丘细胞复合体中分离得到待授精卵母细胞，再进行体外受精，生产体外胚胎，实现提高羔羊体外胚胎的发育能力。