[发明专利]一种微生物检测方法在审
| 申请号： | 201710795218.4 | 申请日： | 2017-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN108950060A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 梅婷;曾令文 | 申请（专利权）人： | 武汉中科志康生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 武汉今天智汇专利代理事务所(普通合伙) 42228 | 代理人： | 邓寅杰;严超 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖高新区高*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 微生物 微生物检测 复合体 靶标微生物 磁珠微球 核酸序列 标靶 抗体 检测 细菌基因组 抗体标记 特异识别 外源核酸 病原体 复合物 磁珠 构建 扩增 偶联 脱附 外源 吸附 制备 蛋白 细菌 病毒 细胞 | ||
1.一种微生物检测方法，其特征在于包括以下步骤：
1），构建抗体标记磁珠微球，将所需检测的标靶微生物抗体与磁珠微球结合，形成复合体；
2），配置特异微生物识别靶标，该微生物识别靶标能与靶标微生物结合，形成带有外源核酸的复合物，将步骤1）产物与其偶联，形成微生物-抗体-磁珠复合体；
3），将标靶微生物与步骤2）所得的复合体混合，使标靶微生物的特定核酸序列与复合体吸附，吸附完成后分离出吸附特定核酸序列的复合体；
4），采用磁性分离的方法，将步骤3）所得的复合体中特定核酸序列分离；
5），扩增步骤4）所得的特定核酸序列，而后检测，得到标靶微生物的检测结果。
2.根据权利要求1所述的微生物检测方法，其特征在于：所述靶标微生物可以是细菌、病毒、病原体、细胞或蛋白。
3.根据权利要求1所述的微生物检测方法，其特征在于：所述步骤1）中，磁珠微球直径为20-25nm。
4.根据权利要求1所述的微生物检测方法，其特征在于：所述步骤1）中，抗体可以是一种或多种。
5.根据权利要求1所述的微生物检测方法，其特征在于：所述步骤3）中，偶联采用EDC和/或NHS方法进行偶联。
6.根据权利要求1所述的微生物检测方法，其特征在于：所述步骤4）中，分离出吸附特定核酸序列的复合体采用超滤管纯化的方式。
7.根据权利要求1所述的微生物检测方法，其特征在于：所述步骤6）中，采用PCR或SDA法进行扩增。
8.根据权利要求1~7任意一项所述的微生物检测方法，其特征在于：所述步骤6）中，采用荧光定量PCR法或核酸胶体金检测卡对扩增后的核酸序列检测。
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