[发明专利]一种北葶新苷E及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及北葶新苷E及其制备方法与应用，可有效解决从北葶苈子中提取北葶新苷E及用于制备治疗心肌细胞H9c2损伤药物的问题，北葶苈子清炒，加水煎煮提取，提取液浓缩，醇沉，上清液浓缩至无醇味，上Dianion HP‑20柱，用水、乙醇梯度洗脱，收集60%乙醇洗脱液，用水溶解，离心，沉淀用甲醇溶解，硅胶拌样，二氯甲烷︰甲醇为流动相梯度洗脱，收集二氯甲烷、甲醇5︰1的流份用水溶解，通过ODS柱色谱，用水洗脱，洗脱液用半制备HPLC分离，上YMC‑Pack ODS‑AQ色谱柱，流动相为乙腈：水=10：90，收集保留时间t_R=20.7~30.0min的流份，浓缩干燥，得北葶新苷E。本发明原料丰富，制备方法科学合理，该化合物对心肌细胞有保护作用，可有效用于制备治疗心肌细胞H9c2损伤的药物。

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种北葶新苷E及其制备方法与应用。

背景技术

葶苈子为常用中药材，始载于《神农本草经》，列为草部下品，该药味辛、苦，性大寒，归肺与膀胱经，具有宣泄平喘、行水消肿的功效。2015版《中国药典》收录的“葶苈子”有南北之分，其中十字花科植物独行菜Lepidium apetalum Willd.的干燥成熟种子习称“北葶苈子”，而播娘蒿Descurainia Sophia(L.)Webbex Prantl.的干燥成熟种子习称“南葶苈子”。

从研究的试验中发现，北葶苈子中含有一种鼠李糖酚苷类化合物，即北葶新苷E，但该类化合物如何从北葶苈子中提取出来，并有效用于制备治疗心肌细胞H9c2损伤的药物，至今未见有公开报导。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种北葶新苷E及其制备方法与应用，可有效解决从北葶苈子中提取北葶新苷E及用于制备治疗心肌细胞H9c2损伤药物的问题。

本发明解决的技术方案是，一种北葶新苷E及其制备方法与应用，其中北葶新苷E分子式为C₁₂H₁₆O₇，分子结构式见图1，该北葶新苷E的制备方法是：

取北葶苈子，采用清炒法炮制，温度240℃，炒制5.5min，取炒制的北葶苈子，每次加北葶苈子10倍重量的水煎煮提取三次，每次1.5h，提取液减压浓缩至相当于含生药2g/mL的浸膏，在室温下，浸膏用浸膏5倍体积、体积浓度为80％的乙醇醇沉，静置1h，将上清液倒出，沉淀再加入浸膏5倍体积、体积浓度为80％的乙醇醇沉，如此反复操作4次，将所得上清液浓缩至无醇味，上Dianion HP-20柱，依次用10倍柱体积的水、体积浓度20％、40％、60％乙醇梯度洗脱，流速6mL/min，收集60％乙醇洗脱液，记为组分A；在室温下，组分A用5倍体积的水溶解，用6000r/min的转速离心15min，温度20℃，所得上清液记为水溶物组分B1，离心之后的沉淀记为水不溶物B2；组分B2用甲醇溶解，硅胶拌样，组分B2与硅胶用量为1︰1，以二氯甲烷︰甲醇为流动相梯度洗脱，流速10mL/min，所用比例依次为100:0、20:1、10:1、5:1、1:1，每200mL检识一次，每个流动相的用量以茴香醛-浓硫酸薄层检识来判断，3d洗脱完毕，合并二氯甲烷︰甲醇＝5︰1的流份标为组分C4；组分C4用水溶解，通过ODS柱色谱，用水洗脱，流速3mL/min，以茴香醛-浓硫酸薄层检识来判断每个梯度洗脱终点，每20mL检识一次，4h洗脱完毕，收集水洗脱部位标为组分D1；组分D1用半制备HPLC分离，上规格型号为：250×10mm，粒径5μm，孔径12nm的YMC-Pack ODS-AQ色谱柱，流动相为乙腈：水＝10：90，流速3mL/min，收集保留时间t_R＝20.7～30.0min的流份，浓缩干燥，得到化合物北葶新苷E。

该化合物能够显著提高细胞活力，有效用于制备治疗心肌细胞H9c2损伤的药物。