[发明专利]一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒

权利要求书

1.一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于：包括热启动DNA聚合酶、UNG酶、PCR反应缓冲液、dNTPs、引物组。

2.根据权利要求1所述的一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于：所述的PCR反应缓冲液由Buffer、Mg+构成。

3.根据权利要求1所述的一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于：所述的引物浓度为100nM-1000nM。

4.根据权利要求1或3所述的一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于：所述的引物浓度为400nM-600nM。

5.根据权利要求1所述的一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于：所述的引物组由以下10对引物组成：

所述检测ACE rs1799752引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.1、SEQID NO.2所示；

所述检测CYP2C9*3rs1057910引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.3、SEQID NO.4所示；

所述检测ADRB1rs1801253引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.5、SEQID NO.6所示；

所述检测AGTR1rs5182引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.7、SEQID NO.8所示；

所述检测CYP2D6rs1065852引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.9、SEQID NO.10所示。

6.根据权利要求5所述的一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于：所述的SEQ NO 1、SEQ NO 2、SEQ NO 3、SEQ NO4、SEQ NO 5和SEQ NO 6，其碱基序列如下所示：

SEQ NO 1：ACCACTCCCATCCTTTCTCC

SEQ NO 2：AGGCTGAGGCAGGAGAATG

SEQ NO 3：ACGTGTGATTGGCAGAAACC

SEQ NO 4：CCCGGTGATGGTAGAGGTTT

SEQ NO 5：TTCAACTGGCTGGGCTACG

SEQ NO 6：GGCCCTACACCTTGGATTCC

SEQ NO7：TTTGCCACTATGGGCTGTCT

SEQ NO 8：GCCTTCTTTAGGGCCTTCC

SEQ NO9：CCATTTGGTAGTGAGGCAGGTA

SEQ NO10：TGTCAGCAGAAGGGACTTTGTA。

7.根据权利要求1所述的一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于：所述的高血压用药基因检测固相PCR试剂盒中在由热启动DNA聚合酶、UNG酶、PCR反应缓冲液、dNTPs、引物组成的PCR反应混合液的表面封闭一层石蜡混合物，所述的石蜡混合物的熔点在30—38℃之间。

8.根据权利要求7所述的一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于：所述的石蜡混合物由液体石蜡和熔化后的固体石蜡混合而成，固体石蜡选择自熔点高于50℃的固体石蜡，固体石蜡和液体石蜡的比值为1:4—1:12。

9.根据权利要求7或8所述的一种高血压用药基因检测固相PCR试剂盒，其特征在于：所述的固体石蜡和液体石蜡的比值为1:7—1:9。

10.一种如权利要求1所述的高血压用药基因检测固相PCR试剂盒的检测方法，其特征在于：具体步骤如下：

(1)、采集样本并提取核酸，浓度不低于10ng/ul，纯度1.8-2.0之间。

(2)、以核酸样本为模板，采用本发明制得的高血压用药基因检测固相PCR试剂盒进行固相PCR扩增反应，其中25ul PCR反应体系为：23ul PCR反应混合液、核酸模板2ul；

(3)、1.0％琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物；

(4)、结果判读。