[发明专利]一种用于检测禽腺病毒IV型的特异性引物及应用有效
申请号: | 201710812330.4 | 申请日: | 2017-09-11 |
公开(公告)号: | CN107354238B | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 王利丽;鄢明华;郑丽;田向学;任卫科;杨春蕾;李秀丽;路超;李富强;尹姣姣 | 申请(专利权)人: | 天津市畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人: | 朱红星 |
地址: | 300381 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 病毒 iv 特异性 引物 应用 | ||
1.一种用于检测禽腺病毒IV型penton基因的特异性引物,其特征在于:
上游引物FADV4-F:5'-ACAGCCGTGCGCACCAACTGCCCGAAC-3';
下游引物FADV4-R:5'-CTGCAGATCCTCGTAGGTAATAAC-3'
扩增的禽腺病毒IV型penton基因目的片段为498bp。
2.采用权利要求1所述的用于检测禽腺病毒IV型penton基因的特异性引物进行非疾病诊断目的检测方法如下:
(1)提取病毒DNA;
(2)PCR扩增反应:
扩增反应体系:扩增反应的总体积为20.0μL,其各种成分及终浓度分别为:不含Mg2+10×buffer 2μL,2.5 mmol/L dNTPs 2μL,5U/µl Taq酶 0.5µL,10μmol/L FADV4-F 1μL,10μmol/L FADV4-R 1μL, 10μmol/L Mg2+ 1μL,DNA模板4μL,ddH2O加至20μL;
扩增反应过程:95℃预变性5min;30个循环:94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸30s;72℃延伸10min,4℃保存;
(3)扩增产物检测:取扩增产物5μL,通过琼脂糖凝胶电泳,加入EB染色剂,在凝胶成像系统下观察结果。
3.权利要求 1所述用于检测禽腺病毒IV型penton基因的特异性引物在制备检测禽腺病毒IV型penton基因的试剂中的应用。
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