[发明专利]一种氨肽酶及其编码基因和应用

说明书

本发明公开了一种氨肽酶及其编码基因和应用。该氨肽酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了编码该氨肽酶的核苷酸序列。该氨肽酶具有能水解几乎所有的氨基酸残基的作用，具有良好的应用潜力，并且对丰富氨肽酶家族成员，开发我国传统调味品环境资源都具有重要意义。因此，可将其用于制备呈味肽，可通过如下步骤制备呈味肽：将本发明提供的氨肽酶加入到含有蛋白底物的水解反应体系中，在25～35℃条件下进行酶水解反应2～6h，得到相应的呈味肽。

技术领域

本发明属于基因工程和酶工程领域，特别涉及一种氨肽酶及其编码基因和应用。

背景技术

氨肽酶是一类从多肽链的N端顺序水解氨基酸、使氨基酸逐个游离出来的水解酶，其底物作用范围一般较为广谱，不仅能够水解多肽，而且能水解完整的蛋白质分子。氨肽酶主要应用于蛋白质水解、风味肽和生物活性多肽制备以及生物学与医学等领域：当蛋白质大分子酶解时，肽链中含有的疏水性氨基酸暴露出来，接触味蕾而呈现苦味，而这些疏水性氨基酸一般位于肽链末端，而利用氨肽酶进一步水解蛋白质水解液，可以脱除其苦味；与蛋白酶复合使用，在酱油酿造、鱼露生产及其它蛋白水解产品的制备过程中，不仅可以提高蛋白质的利用率，而且能形成风味独特、滋味鲜美的复合氨基酸水解液；利用氨肽酶的酶解制备抗癌、抗氧化、抗菌等特性的活性肽；在医学用途方面，亮氨酰氨肽酶等还可用作蛋白质序列测定的分子工具，脯氨肽酶能有效清除神经毒性化学毒剂及有机磷农药，既可作为医学上的解毒剂，又可以作为环境消毒剂。因而，氨肽酶具有很高的研究价值和更广阔的应用前景。

宏基因组学(Metagenomics)是近年来随着微生物学和现代生命科学的迅猛发展兴起的一门新兴的科学技术。其基本研究思路是直接提取环境中所有微生物的基因组DNA，克隆到合适的载体，构建宏基因组文库，将环境中全部微生物的核酸信息收集在一起，并运用序列筛选或功能筛选方式从文库中获得有用的酶、抗生素、活性物质等。这种完全不依赖于环境中微生物的分离和培养的技术拓展了微生物学的研究思路与方法，为从不同自然生境中的未培养微生物中寻找新的基因资源和活性物质提供了有力的技术手段。

到目前为止，从宏基因组文库中寻找新氨肽酶基因的研究，国内外尚无相关的报道。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种氨肽酶。该酶对N-端氨基酸残基专一性低，能水解几乎所有的氨基酸残基，对丰富氨肽酶家族成员，开发新的蛋白水解成风味肽的途径都具有重要意义。

本发明的另一目的在于提供编码所述氨肽酶的基因。

本发明的再一目的在于提供所述氨肽酶的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种氨肽酶，其氨基酸序列如下所示：

MNFQVQDAAIVIEAVIVALAFFAEKIIFAQQLDAAITGSLQALLAHKGISTVGYAVSLLHSLAGLNVDRYYVGLEGQQLAYGIQTLLRKAGDAFTTIKGGAVSDEQIKLPSFTKQRLDAAVLHIAVVSPGHGAYELTYSKKKDKQELFEFTAIALDDAQLDLEGFISVGDVTGVLLNFARQLGNAHPHVLTPAIKTAEEAVALFGKTDYDVKLDKEQMEGIGNGSLLAVKKGSENIPRLIVLTYNGKEDAAPVVALVGPGITFDSGGYSLKTRQGMEFMKFDMGCGAAVGGTVEAIGHLLPPKNIVGVIPASDNIVNGEAISPLDVGTSLSGYTIEVMNTFPEGRLLLADAVFYAYQDGPGVLADVATLTGAYIVVLGAHKTAGAMINPGILFNQLLDASEEVDEPAGLPAIWGTEGGVVTSDVADLPNYGGRDGTALFEGMFLTEEPENTPWLYLDIAGGSRIEDAVLIGPDGAEGLLVPTLVDLLTREGEAEA。