[发明专利]脆弱拟杆菌提取物在制备防治肠易激综合征的药物中的应用有效
申请号: | 201710812676.4 | 申请日: | 2017-09-11 |
公开(公告)号: | CN109481473B | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
发明(设计)人: | 刘洋洋;智发朝;王晔;白杨;王从峰 | 申请(专利权)人: | 广州知易生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A61P1/12;A61P1/10;A61P1/00;A23L33/135 |
代理公司: | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人: | 刘元霞;彭劲松 |
地址: | 510663 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 脆弱 杆菌 提取物 制备 防治 肠易激 综合征 药物 中的 应用 | ||
1.脆弱拟杆菌荚膜多糖A在制备防治肠易激综合征的药物中的应用,其特征在于,所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为5~70KD;所述脆弱拟杆菌为保藏编号为CGMCC No. 10685的脆弱拟杆菌ZY-312,所述肠易激综合征为腹泻型或便秘型。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为15~65KD。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的分子量为35KD~45KD。
4.根据权利要求1-3任一项所述的应用,其特征在于,所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的制备方法包括以下步骤:
(1)将发酵培养后的脆弱拟杆菌菌液离心沉淀,收集第一沉淀物,取所述第一沉淀物加入65-72℃的水,溶解后再加入苯酚溶液,保持65-72℃搅拌25-35min,离心,收集第一上清液;
(2)将步骤(1)中收集的第一上清液用乙醚萃取去除苯酚,再去除残留的乙醚,收集水相溶液;
(3)在步骤(2)中收集到的水相溶液中加入无水乙醇至乙醇的终浓度为75-85v/v%,醇沉,离心,收集第二沉淀物;
(4)取所述第二沉淀物,加水配制成混悬液,再调节pH为6.5-7.5,离心,收集第二上清液,透析除盐,冷冻干燥,即得所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(1)中在所述第一沉淀物中加入的水、所述苯酚溶液以及所述第一沉淀物的配比为3-5mL:3-5mL:1g;所述苯酚溶液的质量浓度为70-80%。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(3)所述醇沉为在0-8℃的温度下醇沉8-16小时。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(4)包括:取所述第二沉淀物,加水配制成质量浓度为8-12%的混悬液,再加入质量浓度为8-12%的冰乙酸水溶液,加热至沸,搅拌反应1.5-2.5小时,调节pH为6.5-7.5,离心,收集第二上清液,透析除盐,冷冻干燥,即得所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A。
8.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述脆弱拟杆菌荚膜多糖A的制备方法还包括降解的步骤:将步骤(4)中得到的脆弱拟杆菌荚膜多糖A通过超声的方法进行降解,所述超声的条件为:180-210kHz,15-25℃。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述超声的条件为:195kHz,20℃。
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