[发明专利]一种生物微乳液小胶束、膀胱癌细胞悬液及小鼠气囊膀胱癌模型的构建方法有效
申请号: | 201710814807.2 | 申请日: | 2017-09-12 |
公开(公告)号: | CN107523543B | 公开(公告)日: | 2020-07-14 |
发明(设计)人: | 徐万海;彭锂;王璐;郭鹏宇;王志超 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨医科大学 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 邓宇 |
地址: | 150081 黑龙江省哈尔滨市*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 乳液 胶束 膀胱 癌细胞 小鼠 气囊 膀胱癌 模型 构建 方法 | ||
1.一种生物微乳液小胶束,其特征在于,所述生物微乳液小胶束是通过如下步骤进行制备的:
1)将氨基的树状大分子PAMAM用促肿瘤生长液配置成10%(质量)的PAMAM溶液;所述促肿瘤生长液是将VEGF人重组蛋白和Endocan人重组蛋白加入到DMED培养液中配置成促肿瘤生长液;
2)将COOH-PEG-OH加入到步骤1)获得的10%PAMAM溶液中,混合均匀;
3)将5%(质量)醛基化的右旋糖酐与步骤2)获得的溶液按照1:1的体积比进行混合,获得生物微乳液小胶束;步骤2)所述10%(质量)PAMAM溶液和COOH-PEG-OH的质量比为1:7;所述VEGF人重组蛋白和Endocan人重组蛋白在促肿瘤生长液中的终浓度均为10μg/mL。
2.一种用于构建膀胱癌模型的膀胱癌细胞悬液,其特征在于,所述膀胱癌细胞悬液是将对数生长期的膀胱癌细胞进行消化离心,弃上清后将膀胱癌细胞与权利要求1的生物微乳液小胶束进行混合,获得膀胱癌细胞悬液。
3.根据权利要求2所述的膀胱癌细胞悬液,其特征在于,所述生物微乳液小胶束与膀胱癌细胞的体积比为(1:1)-(1:2)。
4.根据权利要求2所述的膀胱癌细胞悬液,其特征在于,所述生物微乳液小胶束与膀胱癌细胞的体积比为1:1。
5.根据权利要求2所述的膀胱癌细胞悬液,其特征在于,所述消化是用0.25%胰蛋白酶消化3min-5min。
6.权利要求2所述的膀胱癌细胞悬液在构建膀胱癌模型中的应用。
7.一种小鼠气囊膀胱癌模型的构建方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
步骤一:取5周龄小鼠,麻醉小鼠后在小鼠背部选择一块区域将鼠毛剔除干净,注入无菌空气3mL,以后每隔一天补充注入无菌空气1mL,5天后气囊构建完毕;
步骤二:将权利要求2制备获得的膀胱癌细胞悬液接种于步骤一构建的气囊的最低点,并在接种结束后,继续保持体位2min至生物微乳液小胶束凝固,之后每隔一天注入无菌空气1mL,直至形成肿瘤,即获得小鼠气囊膀胱癌模型。
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