[发明专利]一种激素诱导密刺苦草工程苗的快繁方法

权利要求书

1.一种激素诱导密刺苦草工程苗的快繁方法，其特征是，包括如下步骤：

1)外植体的消毒

采集生长良好、健壮的密刺苦草植株，用清水清洗3～4遍，清除密刺苦草表面附着物，将密刺苦草叶子去除；然后对密刺苦草根茎段消毒，最后截取0.5～1.0cm带节间的根茎段；

2)出芽诱导

将消毒后的密刺苦草根茎段移入添加了0.5～2mg/L 6-BA和0.1mg/L NAA和2.0％蔗糖和8mg/L琼脂的MS培养基，设置温度20～25℃，光照强度1500～3000Lux，光照12h/d，培养10～15天，诱导生芽；

3)增殖培养

将经步骤2)得到的培养物接入分化与增殖培养基中培养20～25天，设置温度20～25℃，光照强度1500～3000Lux，光照12h/d，以获得更多的密刺苦草的芽；分化与增殖培养基为每升MS培养基中含有1.0mg 6-BA和0.1mg NAA和2.0％蔗糖和8mg琼脂；

4)生根培养

将步骤3)获得的密刺苦草芽转接于生根培养液中诱导生根，设置温度20～25℃，光照强度1500～3000Lux，光照12h/d，培养10～15天即可得到密刺苦草苗，生根培养液为添加了0.5～1mg/L IBA和0.1mg/L 6-BA和2.0％蔗糖和5mg/L琼脂的霍格兰营养液；

5)炼苗

将步骤4)获得的密刺苦草苗移栽到底部铺有经过灭菌的沙石的玻璃培养钵；保持水深20～30cm，每7～10天换水并添加一定量霍格兰营养液以促进其生长；当室外白昼气温18℃以上时，将玻璃培养钵置于室外，直接利用自然太阳光照；否则，将玻璃缸置于温室中，昼夜温度分别保持18℃和25℃以上，并在白天适当补充人工光照。

6)移栽

上述培养保持到密刺苦草植株长至25cm以上即可移栽到待修复水体。

2.根据权利要求1所述的一种激素诱导密刺苦草工程苗的快繁方法，其特征是，所述的步骤1)中密刺苦草根茎段消毒过程为先用70～75％的酒精浸泡5～10分钟，然后用9～10％的次氯酸钠溶液浸泡5～30分钟，最后用无菌水冲洗4～5次，每次2～3分钟。