[发明专利]一种激素诱导密刺苦草工程苗的快繁方法在审
申请号: | 201710820368.6 | 申请日: | 2017-09-13 |
公开(公告)号: | CN107333658A | 公开(公告)日: | 2017-11-10 |
发明(设计)人: | 高海龙;詹茂华;程寒飞;朱林;黄建 | 申请(专利权)人: | 中冶华天工程技术有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 马鞍山市金桥专利代理有限公司34111 | 代理人: | 唐宗才 |
地址: | 243005 安徽省马鞍山市*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 激素 诱导 密刺苦草 工程 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种沉水植物培育领域,尤其涉及一种激素诱导密刺苦草工程苗的快繁方法。
背景技术
目前我国湖泊河流污染严重,大多数水体呈现富营养化或正在富营养化。富营养化带来的最严重的后果之一为浮游植物大量增殖,水生植物尤其是沉水植物大量消亡。沉水植物作为湖泊生态系统的一个重要组成部分和主要的初级生产者之一,其对湖泊生态系统的物质和能量的循环起着重要作用,对水体营养系统具有重要的调节作用,特别是沉水植物占据了湖泊中的水和沉积物的主要界面,对湖泊生产力及湖泊生态系统具有非常重要的影响。因此恢复沉水植物被认为是治理富营养化水体的有效和关键手段。
密刺苦草为多年生沉水草本植物,能够越冬,且该物种对水位和底质适应性强,适宜作为湖泊生态修复的建群种。目前市场上对密刺苦草种苗的需求量很大,在生态修复工程和试验研究中都有应用,但种源大多来自自然环境。一方面,大量打捞容易导致原产地生境的破坏;另一方面,自然生境的密刺苦草常带有各种各样的微生物,容易造成移植生境的污染和有关生理生态试验的误差。综上,亟需开发相关的快繁技术为生态修复工程和试验研究以提供稳定优质的工程苗。
发明内容
为解决上述问题,本发明提供了一种激素诱导密刺苦草工程苗的快繁方法,可以在短期内建立较大规模的群落,修复富营养化水体。
本发明的技术方案如下:
本发明一种激素诱导密刺苦草工程苗的快繁方法,包括如下步骤:
1)外植体的消毒
采集生长良好、健壮的密刺苦草植株,用清水清洗3~4遍,清除密刺苦草表面附着物,将密刺苦草叶子去除;然后对密刺苦草根茎段消毒,最后截取0.5~1.0cm带节间的根茎段;
2)出芽诱导
将消毒后的密刺苦草根茎段移入添加了0.5~2mg/L 6-BA和0.1mg/L NAA和2.0%蔗糖和8mg/L琼脂的MS培养基,设置温度20~25℃,光照强度1500~3000Lux,光照12h/d,培养10~15天,诱导生芽;
每升MS培养基含:硝酸铵1650mg,硝酸钾1900mg,氯化钙440mg,硫酸镁370mg,磷酸二氢钾170mg,碘化钾0.83mg,硼酸6.2mg,硫酸镁22.3mg,硫酸锌8.6mg,钼酸钠0.25mg,硫酸铜0.025mg,氯化钴0.025mg,硫酸亚铁27.8mg,乙二胺四乙酸二钠37.3mg,肌醇100mg,烟酸0.5mg,盐酸吡哆醇0.5mg,盐酸硫胺素0.1mg,甘氨酸2.0mg;
3)增殖培养
将经步骤2)得到的培养物接入分化与增殖培养基中培养20~25天,设置温度20~25℃,光照强度1500~3000Lux,光照12h/d,以获得更多的密刺苦草的芽;分化与增殖培养基为每升MS培养基中含有1.0mg 6-BA和0.1mg NAA和2.0%蔗糖和8mg琼脂;
4)生根培养
将步骤3)获得的密刺苦草芽转接于生根培养液中诱导生根,设置温度20~25℃,光照强度1500~3000Lux,光照12h/d,培养10~15天即可得到密刺苦草苗,生根培养液为添加了0.5~1mg/L IBA和0.1mg/L 6-BA和2.0%蔗糖和5mg/L琼脂的霍格兰营养液;
霍格兰营养液的配方:
每升营养液中含:四水硝酸钙945mg、硝酸铵80mg、磷酸二氢钾136mg、硫酸镁493mg,七水硫酸亚铁2.78g,乙二胺四乙酸二钠3.73g;微量元素:碘化钾0.00415mg,硼酸0.031mg,硫酸锰0.1115mg,硫酸锌0.043mg,钼酸钠0.00125mg,硫酸铜0.000125mg,氯化钴0.000125mg;
5)炼苗
将步骤4)获得的密刺苦草苗移栽到底部铺有经过灭菌的沙石的玻璃培养钵;保持水深20~30cm,每7~10天换水并添加一定量霍格兰营养液以促进其生长;当室外白昼气温18℃以上时,将玻璃培养钵置于室外,直接利用自然太阳光照;否则,将玻璃缸置于温室中,昼夜温度分别保持18℃和25℃以上,并在白天适当补充人工光照。
6)移栽
上述培养保持到密刺苦草植株长至25cm以上即可移栽到待修复水体。
进一步地,所述的步骤1)中密刺苦草根茎段消毒过程为先用70~75%的酒精浸泡5~10分钟,然后用9~10%的次氯酸钠溶液浸泡5~30分钟,最后用无菌水冲洗4~5次,每次2~3分钟。
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