[发明专利]GDF11在脂肪间充质干细胞成骨分化中的应用有效
申请号: | 201710828445.2 | 申请日: | 2017-09-14 |
公开(公告)号: | CN107828719B | 公开(公告)日: | 2020-05-19 |
发明(设计)人: | 任哲;王一飞;王巧利;方思南;胡春霞 | 申请(专利权)人: | 暨南大学 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N15/70;C12N15/12 |
代理公司: | 广州科沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人: | 徐翔 |
地址: | 510632 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | gdf11 脂肪 间充质 干细胞 分化 中的 应用 | ||
1.GDF11蛋白在制备诱导脂肪间充质干细胞成骨分化药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述GDF11蛋白通过基因工程构建pET-22b-gdf11的BL21原核表达菌,在原核表达系统中诱导表达、发酵生产和镍柱分离纯化得到;
所述pET-22b-gdf11的构建方法包括以下步骤:
以人来源的正常细胞的cDNA为模板PCR扩增得到gdf11 DNA片段,其中所用PCR引物为:GDF11-F5'AAAAAGACAGCTATCGCGA3'为上游引物
GDF11-R5'CCCAAGCTTGCCGGATCCTTAAGAGCA 3'为下游引物;
利用BamHI和Hind III酶对pET-22b质粒以及gdf11 DNA片段进行酶切,用T4连接酶将酶切后的pET-22b质粒以及gdf11 DNA片段连接,构建pET-22b-gdf11。
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