[发明专利]一种加米霉素有关物质的检测方法

权利要求书

1.一种加米霉素有关物质的检测方法，其特征是，该方法为高效液相色谱法，利用C18色谱柱实施分离，并利用UV检测器进行定量分析，色谱条件为：流动相A由磷酸氢二钾溶液和乙腈组成，其中乙腈占流动相A总量的8~12%（v/v），流动相B由磷酸氢二钾溶液和乙腈组成，其中乙腈占流动相B总量的68~72%（v/v），进行梯度洗脱，其中，磷酸氢二钾溶液的浓度为0.02mol/L，pH=8.30~8.50；流速为0.8～1.2mL/min；柱温为30～40℃；检测波长为210nm；

所述流动相A和流动相B按照如下梯度程序进行梯度洗脱：

；

所述的加米霉素有关物质是指在加米霉素合成工艺中引入的或降解生成的杂质，包括9-脱氧-9-同型红霉素A(E)肟、9-脱氧-9-同型红霉素A(Z)肟、9-脱氧-12-脱氧-9,12-亚胺醚-(8a-氮杂-8a)-红霉素A和9-脱氧-12-脱氧-6,9-亚胺醚-(8a-氮杂-8a)-红霉素A 混合物、9-脱氧-8α-氮杂-8α-同型红霉素A、（2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R）-2-乙基-3,4,10，13-四羟基-3,5,6,10,12,14-六甲基-11-[[3,4,6-三脱氧-3-二甲氨基-βD-木糖-吡喃己糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环十五烷-15酮、（2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R）-2-乙基-3,4,10，13-四羟基-3,5,8,10,12,14-五甲基-7-（1-丙基）-11-[[3,4,6-三脱氧-3-二甲氨基-βD-木糖-吡喃己糖基]氧]-1-氧杂-7-氮杂环十五烷-15酮、（2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R）-2-乙基-3,4,10，13-四羟基-3,5,6,10,12,14-六甲基-11-[[3,4,6-三脱氧-3-二甲氨基-βD-木糖-吡喃己糖基]氧]-1-氧杂-7-氮杂环十五烷-15酮、（2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R）-2-乙基-3,4,10，13-四羟基-3,5,,10,12,14-五甲基-6-丙基-11-[[3,4,6-三脱氧-3-二甲氨基-βD-木糖-吡喃己糖基]氧]-1-氧杂-7-氮杂环十五烷-15酮、（2R,3S,4R,5S,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-13-[(2,6-二脱氧-3-C-甲基-3-O-甲基-α-L-吡喃核糖基）氧]-2-乙基-3，4，10-三脱氧3,5,8,10,12,14-六甲基 -11-[[3,4,6-三脱氧-3-（二甲氨基）-β-D-吡喃木糖基]氧]-1-氧杂-6-氮杂环-15-酮。

2.根据权利要求1所述的加米霉素有关物质的检测方法，其特征是，以磷酸氢二钾溶液∶乙腈=90:10（v/v）为流动相A，以磷酸氢二钾溶液∶乙腈=30:70（v/v）为流动相B。

3.根据权利要求1所述的加米霉素有关物质的检测方法，其特征是，所述柱温为35℃。

4.根据权利要求1所述的加米霉素有关物质的检测方法，其特征在于，所述磷酸氢二钾溶液的pH=8.40。

5.根据权利要求1所述的加米霉素有关物质的检测方法，其特征在于，所述流速为1.0mL/min。

6.根据权利要求1所述的加米霉素有关物质的检测方法，其特征在于，所述C18色谱柱的规格为：长度250mm，内径 4.6mm，填料粒径5μm。