[发明专利]一种加米霉素有关物质的检测方法

说明书

本发明提供了一种加米霉素有关物质的检测方法，该方法为高效液相色谱法，利用C18色谱柱实施分离，并利用UV检测器进行定量分析，色谱条件为：以磷酸氢二钾溶液∶乙腈=90:10（v/v）为流动相A，以磷酸氢二钾溶液∶乙腈=30:70（v/v）为流动相B，进行梯度洗脱，其中，磷酸氢二钾溶液的浓度为0.02mol/L，pH=8.30~8.50；流速为0.8～1.2mL/min；柱温为30～40℃；检测波长为210nm。本发明方法能够有效的分离出加米霉素的杂质，分离度高，方法简便，易于操作，结果准确可靠，重现性好，灵敏度高。本发明填补了加米霉素有关物质检测领域的空白，为提高和更好地控制加米霉素产品质量提供了可靠保障。

技术领域

本发明涉及一种药物中的杂质检测方法，具体涉及一种加米霉素有关物质的检测方法。

背景技术

加米霉素(英文名Gamithromycin，简称GMM，分子式：C₄₀H₇₆N₂O₁₂，分子量：777.04)为白色或类白色结晶性粉末，无臭，味苦、略有引湿性，在三氯甲烷中极易溶解，在甲醇、稀盐酸中易溶，在乙醇中溶解，在乙腈中略溶，在水中几乎不溶。

加米霉素为15元环的半合成氮杂大环内酯类兽用抗生素，其主要通过与细菌核糖体50S亚基结合，阻止多肽链延长，从而抑制细菌蛋白质的合成。体外试验数据表明，加米霉素对溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线菌、副猪嗜血杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌及支原体等有抑杀作用。加米霉素用于食用动物，具有抗菌谱广、抗菌活性较强、单次给药、吸收迅速、半衰期长、生物利用度高等诸多优点，符合我国兽用专用药的发展趋势，具有良好的临床应用价值和市场前景。

作为一种药物，除了应当具有一定的疗效之外，能否实现精准、便捷的定量分析也是获得广泛推广的技术前提之一。目前，现有技术中只有对加米霉素含量的检测方法的少量报道，而没有关于加米霉素有关物质的检测方法的规定，药典中也未收载加米霉素有关物质的检测方法。随着我国对药品质量控制工作要求的提高，建立有关物质的标准和检测方法成为提高和更好地控制加米霉素质量的迫切需要。

发明内容

本发明的目的就是提供一种加米霉素有关物质的检测方法，该方法能够有效地分离出加米霉素的杂质，结果准确可靠，重现性好，且易于操作。

本发明的目的是这样实现的，一种加米霉素有关物质的检测方法，该方法为高效液相色谱法，利用C18色谱柱实施分离，并利用UV检测器进行定量分析，色谱条件为：流动相A由磷酸氢二钾溶液和乙腈组成，其中乙腈占流动相A总量的8～12％(v/v)，流动相B由磷酸氢二钾溶液和乙腈组成，其中乙腈占流动相B总量的68～72％(v/v)，进行梯度洗脱，其中，磷酸氢二钾溶液的浓度为0.02mol/L，pH＝8.30～8.50；流速为0.8～1.2mL/min；柱温为30～40℃；检测波长为210nm。

本发明方法中，流动相A和流动相B按照下表中的梯度程序进行梯度洗脱：