[发明专利]人脂肪间充质干细胞抗肝纤维化注射液及其制备方法

说明书

[技术领域]

本发明属于生物学技术领域，尤其涉及一种人脂肪间充质干细胞抗肝纤维化注射液及其制备方法。

背景技术]

脂肪组织中含有一类具有多向分化潜力的细胞，即脂肪间充质干细胞，简称脂肪干细胞。其生物学性质与骨髓间充质干细胞相类似，并可向脂肪、骨、软骨、肝、肌肉、内皮、造血、胰岛和神经等多种细胞方向分化。

脂肪间充质干细胞有一下优势：1、脂肪组织在体内分布广泛，储量丰富。且脂肪组织取材容易，吸脂手术属于技术成熟的常规手术，手术风险小，患者痛苦少，这一点尤其利于临床应用；2、脂肪干细胞的获取效率要优于骨髓间充质干细胞。 细胞克隆形成实验表明，间充质干细胞只占到成人骨髓的(0.2-1)×10^-5。而脂肪组织经胶原酶消化后，其中主要的细胞 类型脂肪细胞，很容易通过浮力而去掉，所获得的细胞克隆形成率是骨髓间充质干细胞的100-500倍；3、从临床角度出发，在短时间内更容易获得大量的脂肪干细胞，对于急性疾病的快速治疗具有重要意义。一次吸脂手术可获得超过200ml的脂肪组织，且每100ml都能获得大约2×10⁸个有核细胞，其中含有大约1.2×10⁸的干细胞，相当于相同体积骨髓的2000倍。

由于脂肪组织在人体内储量丰富，获取简便创伤小，在组织工程、器官修复、基因治疗等方面都有着广阔的应用前景，因此脂肪间充质干细胞已成为继骨髓间充质干细胞后干细胞领域另一个备受关注的热点。

2012年1月，韩国FDA批准的自体脂肪干细胞药物Cuepistem成功上市，用于治疗复杂性克隆氏病并发肛瘘。同年10月，美国FDA批准了Cytori Therapeutics公司脂肪干细胞对心脏衰竭患者有效性的临床试验。

肝纤维化(fibrosis of liver)是多种原因引起的慢性肝损害所致的病理改变，表现为肝内细胞外间质成分过度异常地沉积，并影响肝脏的功能，是慢性肝病发展到肝硬化必经之阶段。引起肝纤维化的病因很多，在国内以病毒性肝炎， 尤其是慢性乙型和丙型肝炎所致的肝纤维化最为常见。

在我国，乙型肝炎病毒表面抗原的检出率约为10％，其中慢性无症状乙型肝炎病毒感染者或慢性无症状HBV携带者就超过1.3亿，现慢性乙肝患者约3000万人。慢性感染患者中 40％可能发生肝硬化或者肝癌，是正常人群的100-200倍。肝纤维化的治疗成为现今人们关注的焦点。

现代医学并无治疗肝纤维化的特异性药物，多采用休息、加强营养、补充维生素等对症治疗方式，严重者需被 迫停止用药，以免加重肝纤维化。尽管中医药对肝纤维化有一定的促再生和修 复作用，但效果仍不是十分理想。

目前也有利用干细胞移植的方法治疗肝纤维化，但多采用脐带间充质干细胞或者骨髓间充质干细胞，细胞来源有限。且输注前细胞处理过程比较简单，不能保证使用过程中细胞的稳定性，不能较长时间保持细胞活性，因此不适于远距离运输。且间充质干细胞表面表达多种黏附分子，主要参与细胞-细胞，细胞-基质之间的特异性粘连过程，影响细胞迁移。因此，在干细胞输注过程中极易促使细胞聚集成团，形成细胞栓，增加了间充质干细胞临床治疗的危险性。发明专利号201010551722.8的发明专利，公布了一种人脐带间充质干细胞抗肝纤维化注射液，由10%-50%人血白蛋白原液和49.5%-89.5%的勃脉力A液、0.5%肝素钙组成，24h后干细胞活率保存在90%以上。但对于更容易获取的人脂肪间充质干细胞，如何运用于抗肝纤维化治疗，是现阶段技术人员急需解决的问题。

发明内容]

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种人脂肪间充质干细胞抗肝纤维化注射液及其制备方法，其具有稳定性高、疗效好、安全性高、便于储存和运输，适应临床大规模使用，应用前景广阔的特点，本发明可为肝纤维化患者带来福音，为临床上干细胞的使用开辟了新的道路。

本发明提供的人脂肪间充质干细胞抗肝纤维化注射液，由人脂肪间充质干细胞保存液和人脂肪间充质干细胞构成；所述的人脂肪间充质干细胞保存液由30%-45%的复方电解质注射液、30-45%羟乙基淀粉200/0.5氯化钠注射液、2%-8%人血白蛋白注射液、2%-5%大株红景天注射液、2%-5%的香菇多糖注射液、2%-5%的黄芪注射液、2%-5%的香丹注射液、2%-5%胎盘多肽注射液、1%-3%维生素C注射液、0.5%-1.5%地塞米松磷酸钠注射液组成；每毫升人脂肪间充质干细胞保存液中含有人脂肪间充质干细胞1×10⁵～5×10⁶个。