[发明专利]一种定量检测血液循环微粒浓度的方法在审
申请号: | 201710847710.1 | 申请日: | 2017-09-19 |
公开(公告)号: | CN107643238A | 公开(公告)日: | 2018-01-30 |
发明(设计)人: | 区景松;袁浩翔;欧志君;简宇鹏;李艳;李华明;戴卫平;汪田田;史茂茂 | 申请(专利权)人: | 中山大学附属第一医院 |
主分类号: | G01N15/00 | 分类号: | G01N15/00 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 510000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 定量 检测 血液循环 微粒 浓度 方法 | ||
1.一种用于循环微粒检测的血液样品的前处理方法,包括以下步骤:
采用缓冲液将血液进行稀释后采用5μm滤膜进行过滤;
将所述过滤后血液中的微粒进行抗体染色,得到待测样品;
所述染色为:采用AnnexinV抗体对微粒进行染色。
2.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述稀释用缓冲液包括PBS、0.9%氯化钠等渗溶液中的一种。
3.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述稀释的倍数为5~100倍体积。
4.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述滤膜的材质为聚苯烯。
5.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述过滤的速度为10~100ul/s。
6.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述抗体染色后,避光孵育25~30min。
7.一种定量检测血液循环微粒浓度的方法,包括以下步骤:
采用流式细胞仪检测权利要求1~6任意一项所述前处理方法得到的待测样品中微粒和血小板的比例;
采用血细胞计数仪检测所述待测样品中血小板的浓度,根据所述微粒和血小板的比例以及血小板的浓度得到微粒的浓度。
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