[发明专利]一种超高效液相色谱‑串联质谱检测烟用纸中14种禁用着色剂的测定方法

权利要求书

1.一种超高效液相色谱-串联质谱检测烟用纸中14种禁用着色剂的测定方法，其特征在于：首先将烟用纸剪碎后加乙醇，然后超声萃取，萃取液离心后、过滤、并经乙腈稀释后直接以超高效液相色谱-串联质谱测定纸张中的禁用着色剂，具体包括以下步骤：

a、称取0.5 g样品，并置于50 mL具塞三角瓶中；

b、样品的提取：准确加入20 mL 萃取液：乙醇，超声萃取30 min；

c、样品净化：静置5 min, 移取萃取液1.5 mL于2 mL离心管中，以8000 rpm 速率离心5 min，吸取1mL上清液，氮吹近干，用1mL 乙腈复溶，经0.22μm有机相滤膜过滤；

d、移取200μL的滤液，用乙腈将样品稀释至1.0 mL，作为样品待测液进UPLC-MS/MS分析；

e、准备标准工作溶液：称取10 mg的禁用着色剂标准品到100 mL容量瓶中，用乙醇稀释并最终配制成具有浓度梯度的标准工作溶液；

f、液相色谱-串联质谱测定:吸取配制好的不同浓度的标准工作溶液以及样品待测液，分别注入超高效液相色谱-串联质谱仪，

采用的液相色谱条件为：色谱柱：Poroshell 120EC C18快速柱，规格100 mm×4.6 mm, 2.7 μm；流动相A：乙腈，B：20 mmol醋酸铵-0.1 %甲酸水溶液，流速：500 μL/min，梯度洗脱；柱温：40 ℃；进样量：2μL；

采用的质谱条件：扫描方式：正离子扫描; 电喷雾离子源(ESI); 离子源温度：150 ℃；脱溶剂气温度：350 ℃；脱溶剂气流量：800 L/h；停留时间：30 ms；毛细管电压：2.4 kV；检测方式：多离子反应监测（MRM）；

g、禁用着色剂测定结果的计算

以外标法进行定量分析，即以禁用着色剂的定量离子对峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.99；对提取后的样品待测液进行测定，测得检出禁用着色剂的定量离子对峰面积，代入标准曲线求得样品中的禁用着色剂的残留量。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：标准工作溶液的配制方式如下：准确称取10 mg的禁用着色剂于100 mL容量瓶中，精确至0.1 mg，用乙醇溶解并定容，配制成浓度为100μg/mL标准储备溶液；分别移取100μL 标准储备溶液到10 mL容量瓶中，用乙醇定容，此标准溶液浓度为1.0 μg/mL；分别移取一定体积的工作溶液于10 mL容量瓶中，用乙腈稀释定容，即配制成不同浓度的标准工作溶液，系列标准工作溶液浓度分别为：5 ng/mL，10 ng/mL，25 ng/mL，50 ng/mL，和100 ng/mL。

3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：步骤f中，所述梯度洗脱程序如下表：

。

4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：所述烟用纸为烟用内衬纸、接装纸或条盒包装纸、卷烟纸。