[发明专利]一种超高效液相色谱‑串联质谱检测烟用纸中14种禁用着色剂的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于烟用纸中有害物质残留的理化检验技术领域，主要涉及烟用内衬纸、接装纸、条盒包装纸、卷烟纸中14种禁用着色剂的测定方法，具体说是采用超声方式萃取禁用着色剂，以超高效液相色谱-串联质谱直接测定的方法。

背景技术

人工合成着色剂主要是以苯、甲苯、萘等芳烃类化工产品为原料，经过磺化、硝化、卤化、偶氮化等一系列有机反应化合而成，本身无营养价值，但由于其成本低廉、色泽鲜艳、着色力强、性质稳定及配色方便，可以增加食品的感官美和提高人们的食欲，在食品生产加工行业中被广泛应用。食品接触材料中的合成着色剂可以通过皮肤接触、迁移等方式进入人体内，从而对人体健康造成危害【赵雪蓉等，精细石油化工，2012，29(6):30】。禁用的着色剂（例如：孔雀石绿、碱性紫5BN、分散红、溶剂黄等）一般都具有强烈的毒性、致突变性、致癌性和致畸性。研究表明，过量摄入人工合成着色剂，将会在体内蓄积，且人工合成食用着色剂大多为偶氮类化合物，偶氮化合物在体内分解，可形成致突变原前体—芳香胺类化合物，对肾脏、肝脏产生一定的伤害，对食用者健康危害极大。目前，对着色剂的测定主要采用高效液相色谱法【田富饶等，化学分析计量，2012，21(6):36】、气相色谱-质谱法【 刘丽等，分析化学，2004，32(10):1333】。这些方法基质干扰大，且着色剂种类多，难以完全分离，液相色谱-串联质谱采用多反应离子监测模式可以克服这类问题。

发明内容：

本发明的目的正是基于上述现有状况而提供的一种超高效液相色谱-串联质谱检测烟用纸中14种禁用着色剂的测定方法，本方法克服了现有技术缺陷，能够快速、准确检测纸张中禁用着色剂残留量，方法环保，且测定结果准确、干扰少。

本发明鉴于上述现有的分析方法，考虑到烟用纸张中禁用着色剂的含量很低，而且禁用着色剂沸点较高，干扰大的特点因此选用灵敏度高、抗干扰能力强的超高效液相色谱-串联质谱的方法分析。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种超高效液相色谱-串联质谱检测烟用纸中14种禁用着色剂的测定方法，首先将烟用纸剪碎后加乙醇，然后超声萃取，萃取液离心后、过滤、并经乙腈稀释后直接以超高效液相色谱-串联质谱测定纸张中禁用着色剂的方法，具体包括以下步骤：

a、称取0.5 g样品（精确至0.01 g），并置于50 mL具塞三角瓶中。

b、样品的提取：准确加入20 mL 萃取液：乙醇，超声萃取30 min；

c、样品净化：静置5 min, 移取萃取液1.5 mL于2 mL离心管中，以8000 rpm 速率离心5 min。吸取1mL上清液,氮吹近干，用1mL 乙腈复溶,经0.22μm有机相滤膜过滤。

d、移取200μL的滤液，用乙腈将样品稀释至1.0 mL，作为样品待测液进UPLC-MS/MS分析；

e、准备标准工作溶液：称取10 mg的禁用着色剂标准品到100 mL容量瓶中，用乙醇稀释并最终配制成具有浓度梯度的标准工作溶液；

f、液相色谱-串联质谱测定:吸取配制好的不同浓度的标准工作溶液以及样品待测液，分别注入超高效液相色谱-串联质谱仪；

g、禁用着色剂测定结果的计算

以外标法进行定量分析，即以禁用着色剂的定量离子对峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.99。对提取后的样品待测液进行测定，测得检出禁用着色剂的定量离子对峰面积，代入标准曲线求得样品中的禁用着色剂的残留量。

在本发明中标准工作溶液的配制方式如下：准确称取10 mg的禁用着色剂于100 mL容量瓶中，精确至0.1 mg，用乙醇溶解并定容，配制成浓度为100μg/mL标准储备溶液；分别移取100μL 标准储备溶液到10 mL容量瓶中，用乙醇定容，此标准溶液浓度为1.0 μg/mL；分别移取一定体积的工作溶液于10 mL容量瓶中，用乙腈稀释定容，即配制成不同浓度的标准工作溶液，系列标准工作溶液浓度分别为：5 ng/mL，10 ng/mL，25 ng/mL，50 ng/mL，和100 ng/mL；