[发明专利]一种长循环自组装复合纳米制剂、其制备方法及其用途

说明书

本发明涉及一种长循环自组装复合纳米制剂、其制备方法及其用途，长循环自组装复合纳米粒制剂，包括聚乙交酯丙交酯、两性阳离子材料、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇、磷脂、递送靶头聚合多肽H₇K(R₂)₂及肝癌衍生生长因子小干扰RNA；粒径为50‑200 nm；其中，采用聚乙交酯丙交酯（PLGA）作为疏水性刚性内核，包裹HDGF siRNA，磷脂与二硬脂酰磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇（DSPE‑PEG）相互交叉分布在PLGA的表面，并对纳米粒表面进行多肽H₇K(R₂)₂、聚乙二醇修饰。本发明可以制成溶液剂、冻干剂通过静脉注射方式给药。具有脑胶质瘤的靶向性，且制备工艺简单、反应条件温和、易于操作。

技术领域

本发明属于药物制剂领域。具体涉及递送肝癌衍生生长因子小干扰RNA的长循环自组装复合纳米粒制剂，及其制备方法及应用。

技术背景

神经胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤，发生于神经外胚层，约占颅内肿瘤的30％-60％，其具有“发病率高、复发率高、死亡率高、治愈率低”的三高一低的特点。国际流行病学统计资料显示，胶质瘤的发病率居各种肿瘤的第9位。目前胶质瘤仍缺乏有效治疗且预后差，死亡率呈逐年上升趋势，快速侵袭性生长是造成这一状况的根本因素。临床上即便采取了最大程度切除肿瘤并联合放疗、化疗及免疫治疗等多种综合治疗措施，恶性胶质瘤患者的平均生存期也仅为15个月左右。因此抑制胶质瘤在脑内的侵袭对延长患者的生存期和提高患者生存质量具有重要的科学和社会意义。

由于神经胶质瘤的浸润性生长及特殊的脑部生长位置，化疗药物成了重要的手术辅助治疗药物。美国FDA先后批准可口服新药替莫唑胺(TMZ)和注射用药贝伐单抗作为治疗胶质瘤的标准药物，但由于TMZ极易产生耐药作用，而贝伐单抗毒性较大，会损伤生殖功能，故在临床上的应用都受到一定限制。基于此，基因治疗近年来成为了胶质瘤治疗的研究热点。

Rechard于1992年首次提出胶质瘤的“分子外科治疗”，即胶质瘤的基因治疗。目前研究最多的基因治疗方案有自杀基因、反义癌基因、抑癌基因、免疫基因、抗肿瘤血管基因治疗等。基因治疗的有效性在实验动物体内已得到证实，但还未正式应用到临床治疗胶质瘤。胶质瘤的发生发展复杂多变，涉及多个基因在不同阶段的不同参与，因此很多学者通过着眼于肿瘤分子水平的分子标志物来判定胶质瘤分级及发展程度，比如鼠类肉瘤病毒癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncogene，KRas)，血小板衍生因子(Platelet derivedgrowth factor，PDGF)，视网膜母细胞瘤肿瘤抑制蛋白(Retinoblastoma，RB)，p53肿瘤抑制蛋白(Tumor suppressor gene，Tp53)，增殖细胞核抗原(Proliferating Cell NuclearAntigen，PCNA)，这些分子水平的改变直接对应了肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭、血管生成等一系列生物学行为。通过分子水平的改变，对应改变不同的基因治疗靶点和治疗方式，所以找出有效的靶基因是基因治疗能达到理想效果的关键。

癌衍生生长因子(hepatoma-derived growth factor，HDGF)是从人肝癌细胞系HuH-7培养液中分离出的一种酸性肝素结合蛋白。大量研究表明HDGF在包括胶质瘤在内的多种恶性肿瘤中高表达，表达水平与肿瘤分期、分级及肿瘤坏死程度成正相关，具有促进细胞增殖、促进血管生成等多种生理作用，与肿瘤预后密切相关，并可作为一个独立的预后检测因素。研究证实，以HDGF做为胶质瘤的治疗靶点，可以改善胶质瘤的预后，提高病人生存质量，是胶质瘤治疗的一个新策略。