[发明专利]一种醋酸西曲瑞克及其制剂的有关物质测定方法

说明书

本发明公开了一种醋酸西曲瑞克及其制剂的有关物质测定方法，所述方法步骤如下：步骤1，称取西曲瑞克杂质，加乙腈溶解，再用乙腈与硫酸盐缓冲溶液稀释，制成杂质对照品溶液；步骤2，称取西曲瑞克，加乙腈使溶解，再用乙腈与硫酸盐缓冲溶液稀释，配制成含西曲瑞克的溶液；步骤3，取杂质对照品溶液和供试品溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算各杂质的含量；本方法有效地解决了分离及其制剂的有关物质的问题，本方法专属性强，重复性好，能保证及其制剂的中有关物质的可控性。

技术领域

本发明涉及一种活性多肽原料药和制剂的分析方法检验方法，特别是涉及醋酸西曲瑞克及其制剂的有关物质测定的方法。

背景技术：

醋酸西曲瑞克(Cetrorelix Acetate)，其化学史称为：N-乙酰-3-(2-萘)-D-丙氨酰-p-氯-D-苯丙氨酰-3-(3-吡啶基)-D-丙氨酰-L-丝氨酰-L-酪氨酰-N5-氨甲酰-D-鸟氨酰-L-亮氨酰-L-精氨酰-L-脯氨酰-D-丙氨酰胺醋酸盐。

其结构式：

醋酸西曲瑞克是一种促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂。GnRH与垂体细胞膜上的受体结合，刺激黄体生成素(LH)及促卵泡成熟激素(FSH)释放。醋酸西曲瑞克与内源性GnRH竞争垂体细胞上的受体，从而抑制内源性LH及FSH的释放。醋酸西曲瑞克的抑制作用在注射后即时产生，没有刺激作用。在女性，醋酸西曲瑞克的作用是推迟LH峰的出现，从而控制排卵。

由于合成方法的原因，醋酸西曲瑞克原料药中会夹杂多种杂质，这些杂质包括本发明人制备的如下杂质：

这些杂质或多或少会影响醋酸西曲瑞克产品的质量，因此有必要对其进行含量控制，为此，本发明构建了一种西曲瑞克有关物质的分析方法，该方法应专属性好，能将可能的降解杂质和可能的残留中间体与主成分有效分开，且灵敏度高，可应用于西曲瑞克的质量控制。

发明内容：

本发明提供一种醋酸西曲瑞克及其制剂有关物质的检测方法，所述方法步骤如下：

步骤1，对照品溶液配制：

称取西曲瑞克杂质，加乙腈溶解，再用乙腈与硫酸盐缓冲溶液稀释，制成杂质对照品溶液；

步骤2，供试品溶液配制：

称取西曲瑞克，加乙腈使溶解，再用乙腈与硫酸盐缓冲溶液稀释，配制成含西曲瑞克的溶液；

步骤3，测定

取杂质对照品溶液和供试品溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积分别计算各杂质的含量；

其中，所述高效液相色谱的色谱条件如下：

以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，采用紫外检测器，选用乙腈和硫酸盐缓冲溶液为流动相，梯度洗脱；其中所述梯度洗脱，方式如下：

0～10分钟，乙腈洗脱比例0～20％，10～30分钟，乙腈洗脱比例10％～40％，30～50分钟，乙腈洗脱比例30％～60％，50～70分钟，乙腈洗脱比例保持在30％～60％％；检测波长为210nm～240nm；流速为0.8～1.5ml/min；进样量为5～50μl。

其中所述硫酸盐缓冲溶液选自：硫酸铵溶液，硫酸钠溶液，硫酸钾溶液，或硫酸和氨水的混合溶液，缓冲溶液浓度不超过0.1％，pH值为2～3。

优选的，本发明所述的检测方法，步骤如下：

步骤1，对照品溶液配制：