[发明专利]一个花椰菜器官发育调控miRNA序列及其应用有效
申请号: | 201710872496.5 | 申请日: | 2017-09-25 |
公开(公告)号: | CN107446928B | 公开(公告)日: | 2021-02-05 |
发明(设计)人: | 王春国;李慧;陈成彬;宋文芹 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20 |
代理公司: | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人: | 朱红星 |
地址: | 300071 天津市南*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一个 花椰菜 器官 发育 调控 mirna 序列 及其 应用 | ||
1.一个利用在花椰菜器官发育中发挥关键调控作用miRNA-1前体序列培养高植株、少分支转基因植物的方法,其特征在于它按如下的步骤进行:
(1)花椰菜总DNA提取;
(2)花椰菜miRNA-1前体的扩增;
首先利用生物学软件设计带
上游引物:5’ CCATGGGTAGAGAAGAATCTGTAAAGCTCAG3’;
下游引物:5’GGTCACCGTAGTAAGAAGAGCCAATGAAACT3’
(3)花椰菜miRNA-1植物过表达载体的构建及鉴定;
(4)遗传转化;
(5) miRNA-1转基因拟南芥的抗性筛选及分子鉴定;
(6)miRNA-1过表达转基因拟南芥表型分析;
步骤(2)中所述miRNA-1前体序列由序列为5’ ATTTCAGGTGATGTAGTTGAGAAGTAGCTGTAAAGCTCAGGAGGGATAGCGCCATGTCTCACCGGTACTATAAAATGTTTGTATATCTATATTGGCGCTATCCATCCTGAGTTCTATGGCTTCTTCTTGCTTTTATCCTGAGAT 3’组成。
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