[发明专利]一个花椰菜器官发育调控miRNA序列及其应用有效

专利信息
申请号: 201710872496.5 申请日: 2017-09-25
公开(公告)号: CN107446928B 公开(公告)日: 2021-02-05
发明(设计)人: 王春国;李慧;陈成彬;宋文芹 申请(专利权)人: 南开大学
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20
代理公司: 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 代理人: 朱红星
地址: 300071 天津市南*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 一个 花椰菜 器官 发育 调控 mirna 序列 及其 应用
【权利要求书】:

1.一个利用在花椰菜器官发育中发挥关键调控作用miRNA-1前体序列培养高植株、少分支转基因植物的方法,其特征在于它按如下的步骤进行:

(1)花椰菜总DNA提取;

(2)花椰菜miRNA-1前体的扩增;

首先利用生物学软件设计带NcoⅠ和BsteⅡ酶切位点的引物:

上游引物:5’ CCATGGGTAGAGAAGAATCTGTAAAGCTCAG3’;

下游引物:5’GGTCACCGTAGTAAGAAGAGCCAATGAAACT3’

(3)花椰菜miRNA-1植物过表达载体的构建及鉴定;

(4)遗传转化;

(5) miRNA-1转基因拟南芥的抗性筛选及分子鉴定;

(6)miRNA-1过表达转基因拟南芥表型分析;

步骤(2)中所述miRNA-1前体序列由序列为5’ ATTTCAGGTGATGTAGTTGAGAAGTAGCTGTAAAGCTCAGGAGGGATAGCGCCATGTCTCACCGGTACTATAAAATGTTTGTATATCTATATTGGCGCTATCCATCCTGAGTTCTATGGCTTCTTCTTGCTTTTATCCTGAGAT 3’组成。

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