[发明专利]一种提取发酵溶液中低含量红霉素A的方法

说明书

本发明涉及制药领域，具体涉及一种提取发酵溶液中低含量红霉素A的方法，所述方法包括：(1)发酵液陶瓷膜过滤；(2)滤液溶媒萃取，饱和氯化钠洗涤轻相；(3)成盐结晶：轻相中加入水，加酸溶液调节pH，再加入硫氰酸盐，与硫氰酸反应，生成硫氰酸红霉素，用醋酸溶液继续调节pH，析出硫氰酸红霉素,过滤，热水洗涤，过滤，干燥，得到硫氰酸红霉素。发酵液中红霉素A组分低于75％，经过本发明方法处理后，得到符合要求的硫氰酸红霉素成品，且收率达到80％以上。

技术领域

本发明涉及制药领域，具体涉及一种提取发酵溶液中低含量红霉素A的方法。

背景技术

红霉素是一类大环内脂类抗生素，主要包括红霉素A、红霉素B、红霉素C、红霉素D、红霉素E和红霉素F等6种组分，其中以红霉素A的抗菌活力最强。红霉素通常采用微生物发酵的方法进行生产，在发酵培养的过程中，发酵液中的红霉素杂质组分，与主要成分红霉素A同时产生，发酵工艺不同，发酵液中的红霉素组分含量不同。发酵异常时，红霉素A组分的含量较低，低于70％，主要的杂质组分红霉素B、C、D较高。传统的提取工艺，不能有效分离杂质组分。目前主要有两种工艺提取发酵液中的红霉素：工艺1：发酵液微滤、滤液树脂除杂、纳滤浓缩结晶，重结晶。工艺2：发酵液板框过滤、溶媒萃取、萃取液除杂、萃取液结晶。

传统的红霉素发酵液过滤使用微滤膜或板框，过滤精度低，滤液含有大量蛋白和色素，需使用树脂进行净化处理，工艺复杂，生产废水量大。

传统的提取方法，使用溶媒萃取，主要用的溶剂为醋酸丁酯或含有醋酸丁酯的混合溶媒，在硫氰酸红霉素结晶时，得到的硫氰酸红霉素A含量在80％以下，杂质红霉素B+C大于3.0％，结晶过程总收率小于85％。

CN103044508B公开了一种一种从红霉素发酵液中分离大环内酯类抗生素的结晶硫氰酸红霉素提取方法，该方法采用超滤膜过滤，滤液通过纳滤浓缩，将浓缩液中流加硫氰酸红霉素得到粗盐后，将粗盐溶解在醋酸戊酯或二氯甲烷等预溶剂中。或将浓缩液中红霉素在碱性条件下萃取至预溶剂中，然后将进行活性炭脱色，在脱色液中加入丙酮，最后加入硫氰酸盐进行结晶。该专利使用多种溶媒，溶媒回收分离困难，且在溶媒相中脱色，溶媒损耗较大。使用两次结晶，收率损失大。

专利CN105348340A公开了一种硫氰酸红霉素的制备方法，该方法在萃取后的轻相使用饱和氯化钠进行脱水后，使用活性炭进行脱色，然后加入硫氰酸盐溶液，与红霉素成盐后，加入复合溶媒，使用醋酸溶液调节pH结晶得到硫氰酸红霉素。该专利在溶媒中使用活性炭，不宜回收，溶媒损失较大，且成盐时加入复合溶媒，溶媒成分较多，分离困难。

CN201610177576公开了一种高纯度红霉素A的制备方法，该方法取硫氰酸红霉素，在有机溶剂和水组成的两相中，加碱溶解，取有机相，加入水进行洗涤，在有机相中析出红霉素A碱，过滤干燥后，再将干粉以水为溶剂进行重结晶，得到高纯度的红霉素A。该方法以硫氰酸红霉素为原粉，溶解后，结晶出红霉素A碱，再进行重结晶，得红霉素A。

发明内容

针对以上技术现状，本发明提供一种提取发酵液中低含量红霉素A的方法，该方法得到的成品，红霉素A的含量大于80％，红霉素B+C的含量小于3％，其它杂质含量均符合药典标准。本方法不使用活性炭，溶媒回收时，向母液加入纯化水洗涤，分相取轻相，即可重复用于滤液的萃取，回收方便。本发明所述从发酵溶液中提取低含量红霉素A的方法，其包括：

(1)过滤：发酵液通过截留分子量3万-100万滤膜过滤，收集滤液；

(2)萃取：滤液用有机溶媒萃取，然后用碱调节pH值8.0-12、搅拌至分相，轻相用饱和氯化钠洗涤，得轻相溶液；

(3)结晶：向轻相溶液中加入水，控制温度，然后加入酸溶液调节pH,再加入硫氰酸盐反应，加完后继续反应，然后使用酸溶液继续调节pH值至3.0-6.0、结晶、过滤、干燥，得到硫氰酸红霉素。