[发明专利]一种具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法及应用

权利要求书

1.一种具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法，包括以下步骤：

1)取绿豆除杂、清晰、烘干磨粉，过筛，得绿豆粉末；

2)采用碱提酸沉的方法或者物理方法提取膨化绿豆粉中的蛋白质，并干燥蛋白样品；

3)将步骤2)得到的蛋白样品按比例溶于PBS磷酸缓冲液或蒸馏水中，按比例加入一种或多种消化酶进行水解，将得到的水解产物干燥，得绿豆多肽。

2.根据权利要求1所述的具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中还包括：向绿豆粉末中添加适量的水，搅拌均匀，放入挤压膨化设备中进行挤压膨化。

3.根据权利要求2所述的具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法，其特征在于，挤压膨化机温度控制分别为：一区80℃-100℃，二区110℃-130℃，三区130℃-160℃，螺杆转速10-20Hz。

4.根据权利要求1所述的具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中烘干温度为50℃、烘干后过100目筛。

5.根据权利要求1所述的具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中碱提酸沉的方法包括：

21)将绿豆膨化粉与1M氢氧化钠溶液按照按照1：10的固液比进行混合溶解，并用0.1M和氢氧化钠或盐酸溶液调节PH值至11，震荡过夜；

22)将上述得到的混合液离心，得上清液后用0.1M的盐酸调节PH至3.5；

23)在4℃下静置1小时后，离心，冷冻沉淀，干燥，得蛋白样品。

6.根据权利要求5所述的具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法，其特征在于，所述22)和23)中离心的条件为5000rap，30min。

7.根据权利要求1所述的具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法，其特征在于，所述步骤3)具体为：将冻干得到的蛋白样品按1：20的固液比溶于PH为2的PBS磷酸缓冲液，加入蛋白质量二十分之一的胃蛋白酶，在37℃下酶解15min，调节PH至7.5，再加入蛋白质量二十分之一的胰蛋白酶，在37℃下酶解15min，50℃灭酶20min，将得到的水解产物冷冻干燥，即得绿豆多肽。

8.一种根据权利要求1-7任一所述的具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法制备得到的绿豆多肽。

9.一种根据权利要求1-7任一所述的具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法制备得到的绿豆多肽在抑制乳腺癌药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的具有抗癌活性的绿豆多肽的制备方法制备得到的绿豆多肽在抑制乳腺癌药物中的应用，其特征在于，所述应用是抑制人乳腺癌细胞的抗癌活性。