[发明专利]基于DNA条形码的海水蟹类物种鉴别方法在审
| 申请号： | 201710879103.3 | 申请日： | 2017-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN108330169A | 公开（公告）日： | 2018-07-27 |
| 发明（设计）人： | 胡则辉;柴学军;王跃斌;胡成硕 | 申请（专利权）人： | 浙江省海洋水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 嘉兴永航专利代理事务所(普通合伙) 33265 | 代理人： | 侯兰玉 |
| 地址： | 316021 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 蟹类 物种鉴别 碱基序列 目的片段 条形码 引物 种蟹 海水 分子生物学鉴别 比对分析 核苷酸序 碱基数 物种 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于DNA条形码的海水蟹类物种鉴别方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
(1)蟹类DNA提取；
(2)利用DNA条形码引物进行PCR扩增，扩增出217bp的产物，所述DNA条形码引物为CS217-F:GGACGATAAGACCCTATAAA；CF 217-R:ATTACGCTGTTATCCCTAAA；
(3)进行物种鉴别的序列特征比对，其中，是按下表所示的核苷酸序列特征变异的位点进行物种鉴别；
2.根据权利要求1所述的基于DNA条形码的海水蟹类物种鉴别方法，其特征在于：步骤(2)所述PCR扩增条件为：94℃预变性2min；94℃变性45s、50℃退火1min、72℃延伸1min，共35个循环；最后72℃延伸10min；反应体系为：12.5μL 2×Taq MasterMix、1μL上游引物(10μmol/L)、1μL下游引物(10μmol/L)、100ng模板DNA，用ddH2O将总体积补足至25μL。
3.一种DNA条形码引物，其特征在于：所述DNA条形码引物的核苷酸序列为：
CS 217-F:GGACGATAAGACCCTATAAA(SEQ ID NO：1)；
CF 217-R:ATTACGCTGTTATCCCTAAA(SEQ ID NO：2)。
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