[发明专利]一种鞘氨醇单胞菌以及在制备结冷胶中的应用有效
申请号: | 201710880521.4 | 申请日: | 2017-09-26 |
公开(公告)号: | CN107435036B | 公开(公告)日: | 2020-06-30 |
发明(设计)人: | 安志勇;杨晓民;胡书祥;刘学珍;林宏博;靳晓伟 | 申请(专利权)人: | 河北沣川生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P19/04;C12R1/01 |
代理公司: | 石家庄海天知识产权代理有限公司 13101 | 代理人: | 田文其 |
地址: | 055650 河北省*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鞘氨醇单胞菌 以及 制备 结冷胶 中的 应用 | ||
1.一种鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)CGMCC No.14238。
2.根据权利要求1所述的鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)CGMCC No.14238在制取结冷胶中的应用,其特征在于包括如下工艺步骤:
A、将鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)CGMCC No.14238接种到灭菌后且含有碳源、氮源及必要营养物质的发酵培养基中;
B、调节发酵培养基的pH,进行通气发酵;
C、当培养液粘度不再增长或发酵周期≤50小时发酵结束;
D、对步骤C中制备的发酵液调整pH至弱碱性,进行升温处理后,调pH至弱酸性,经后提取制成结冷胶;
步骤B中通气发酵的条件如下:
10小时内:温度32℃-34℃,压力0.03MPa-0.05MPa,pH=7.0-7.5,通风量0.2vvm-0.3vvm;
10-20小时:温度32℃-34℃,压力0.03MPa-0.05MPa,pH=7.0-7.5,通风量0.3vvm-0.4vvm;
20-40小时:温度28℃-30℃,压力0.03MPa-0.05MPa,pH=7.0-7.5,通风量0.4vvm-0.5vvm;
40小时-放罐:温度28℃-30℃,压力0.03MPa-0.05MPa,pH=7.0-7.5,通风量0.5vvm-0.6vvm。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于所述的步骤A、B中发酵培养基由如下质量百分含量的原料组成:
淀粉水解糖3%-4%;豆粕水解液0.7%-0.8%;磷酸氢二钾0.1%-0.15%;磷酸二氢钾0.1%-0.15%;聚醚消泡剂0.05%-0.15%;余量为无菌水;pH=7.5-8.0。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于所述的豆粕水解液采用如下方法制作:将大豆粉碎至20-40目后用自来水配置成质量百分比浓度为35-40%的混合液,调pH=7.5-8.0,常温浸泡3-4小时,升温至80-90℃保持40分钟后过滤取清液。
5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于步骤B中pH的调整采用浓氨水。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于浓氨水的质量百分比浓度为18%-20%。
7.根据权利要求2所述的应用,其特征在于所述的步骤A中将鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)CGMCC No.14238经过扩大培养后,按照种子液:发酵培养基=8%-12%的接种量将种子液接种于灭菌后的发酵培养基中。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于所述的扩大培养包括:
(1)将鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)CGMCC No.14238接种于摇瓶种子培养基制成摇瓶种子;
(2)将摇瓶种子经扩大培养后制成种子液;
(3)按种子液:发酵培养基=8%-12%的接种量,将制成的种子液接入发酵罐内灭菌后的发酵培养基中进行发酵。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于所述的步骤(1)中制备摇瓶种子的工艺条件是:挑取一环斜面菌种接入灭菌后的摇瓶种子培养基中,经振荡培养制成摇瓶种子,培养温度为28-32℃、转速为200-220转/分钟,培养周期为10-13小时;摇瓶种子培养基由如下质量百分含量的组份组成:
淀粉水解糖1.0%-1.5%;胰蛋白胨0.4%-0.5%;酵母膏0.5%-0.6%;生物素5ppm-10ppm;余量为无菌水;pH=7.5-8.0。
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