[发明专利]分离的重组溶瘤痘病毒、药物组合物及其在治疗肿瘤和/或癌症的药物中的用途

说明书

本发明提供了分离的重组溶瘤痘病毒、药物组合物及其在治疗肿瘤和/或癌症的药物中的用途。所述分离的重组溶瘤痘病毒是TK基因和VGF基因功能缺陷型的，并且该重组溶瘤痘病毒的基因组中整合有外源IL‑21基因，并且该IL‑21基因能够在肿瘤细胞中表达。所述重组溶瘤痘病毒能够选择性地在肿瘤细胞中复制，还能够充分发挥外源IL‑21的抗肿瘤免疫作用，从而能够使溶瘤病毒的溶瘤杀伤作用和IL‑21的抗肿瘤免疫刺激作用产生协同效果。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体而言，涉及分离的重组溶瘤痘 病毒、药物组合物及其在治疗肿瘤和/或癌症的药物中的用途。

背景技术

溶瘤病毒是一种能够在肿瘤细胞中选择性复制并杀伤肿瘤细 胞，但不伤害正常细胞的一类病毒。病毒在受感染的肿瘤细胞内进行 复制后，释放出新的病毒颗粒，进而感染其周围的肿瘤细胞，进一步 起了溶瘤作用，除了这一直接的溶瘤作用外，溶瘤病毒还可有效刺激 机体产生针对病毒自身及针对被感染肿瘤细胞的免疫应答。由此可 见，溶瘤病毒的抗肿瘤作用是通过选择性杀伤肿瘤细胞和诱导机体产 生系统性抗肿瘤免疫反应的双重作用来实现的。

早在19世纪末人们就发现多种病毒可缓解肿瘤发展的进程，提 示了病毒在肿瘤治疗领域的潜力。随着基因技术的发展，可通过改变 病毒基因组结构使其可选择性地在肿瘤细胞内进行复制，提升其溶瘤 靶向性。近十年来，研究者们以基因重组、基因转入、基因敲除等技 术开始对腺病毒、疱疹病毒、小核糖核酸病毒、痘病毒等病毒进行了 基因改构，为此开发出一系列的溶瘤病毒产品。迄今为止大约有20 多个产品进入临床研究的不同阶段。其中，2005年中国CFDA批准 了上海三维生物技术有限公司的基因改构溶瘤腺病毒H101上市，用 于治疗头颈部肿瘤，这是世界范围内首个上市的溶瘤病毒药物。10 年之后的2015年，第二个溶瘤病毒药物，即Amgen公司的基因改构 溶瘤单纯疱疹病毒T-Vec才被美国FDA以及欧盟EMA批准上市， 用于治疗晚期恶性黑素瘤。目前尚未有基因改构的痘病毒作为药物上 市。

目前在肿瘤和/或癌症的溶瘤病毒免疫治疗中，仍然需要开发出 效果更好的药物。

发明内容

为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了分离的重 组溶瘤痘病毒、药物组合物及其在治疗肿瘤和/或癌症的药物中的应 用。

具体而言，本发明提供了：

(1)一种分离的重组溶瘤痘病毒，其中该重组溶瘤痘病毒是TK 基因和VGF基因功能缺陷型的，并且该重组溶瘤痘病毒的基因组中 整合有外源IL-21基因，并且该IL-21基因能够在肿瘤细胞中表达。

(2)根据(1)所述的重组溶瘤痘病毒，其中所述TK基因通过 插入外源核苷酸序列而使该TK基因功能缺陷。

(3)根据(1)所述的重组溶瘤痘病毒，其中所述外源IL-21基 因插入在所述TK基因中，从而使该TK基因功能缺陷。

(4)根据(1)所述的重组溶瘤痘病毒，其中所述VGF基因通 过基因敲除或插入外源核苷酸序列而使该VGF基因功能缺陷。

(5)根据(1)所述的重组溶瘤痘病毒，其中所述重组溶瘤痘病 毒是惠氏株或WR株。

(6)根据(1)所述的重组溶瘤痘病毒，其中所述重组溶瘤痘病 毒的基因组中还整合有外源筛选基因，所述外源筛选基因包括gpt基 因，但不包括荧光蛋白基因。

(7)根据(1)或(5)所述的重组溶瘤痘病毒，其中所述外源 IL-21基因来自于小鼠或人。

(8)一种药物组合物，其中该药物组合物包括作为活性成分的 根据(1)-(7)中任一项所述的重组溶瘤痘病毒，及可药用辅料。

(9)根据(8)所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含1 ×10⁵-1×10⁸pfu的所述重组溶瘤痘病毒。