[发明专利]一种lncRNA在藏绵羊低氧适应性检测中的应用有效
申请号: | 201710885564.1 | 申请日: | 2017-09-27 |
公开(公告)号: | CN108330170B | 公开(公告)日: | 2019-02-19 |
发明(设计)人: | 刘建斌;丁学智;曾玉峰;郭宪;袁超;郭婷婷;孙晓萍;岳耀敬;梁春年;褚敏;冯瑞林;牛春娥;郭健;杨博辉 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 730000 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 藏绵羊 低氧适应性 检测 应用 功能基因组学 适应性机制 反刍动物 低氧环境 分子生态 分子育种 极端环境 系统研究 表达谱 胁迫 筛选 支撑 研究 | ||
1.lncRNA在藏绵羊低氧适应性检测中的应用,其特征在于,所述lncRNA为TCONS_00332125、TCONS_00377466或TCONS_00139593;所述TCONS_00332125、TCONS_00377466和TCONS_00139593的序列分别如SEQ IDNO.1-3所示。
2.一种检测藏绵羊肝脏和肺脏组织中低氧适应性的试剂盒,其特征在于,包括以下组分:总RNA的反转录体系和cDNA的扩增体系;所述总RNA的反转录体系中包括总RNA,逆转录酶,dNTP和oligdT;所述cDNA的扩增体系中包括TCONS_00332125引物、TCONS_00377466引物和TCONS_00139593引物,所述TCONS_00332125引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4和SEQ IDNO.5所示,所述TCONS_00377466引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7所示核苷酸序列,所述TCONS_00139593引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示;所述TCONS_00332125、TCONS_00377466和TCONS_00139593的序列如SEQ IDNO.1-3所示。
3.权利要求2所述试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:
提取待测组织样品总RNA;
利用所述总RNA反转录体系将提取的总RNA反转录制备成cDNA;
利用所述cDNA扩增体系,用所述TCONS_00332125引物、TCONS_00377466引物和TCONS_00139593引物对制备得到的cDNA进行qRT-PCR扩增lncRNA。
4.lncRNA在靶基因检测中的应用,其特征在于,所述lncRNA为TCONS_00332125、TCONS_00377466或TCONS_00139593,所述TCONS_00332125、TCONS_00377466和TCONS_00139593的序列分别如SEQ ID NO.1-3所示;所述低氧适应性靶基因的预测通过cis和trans作用方式实现;所述靶基因为ENSOARG00000007330、ENSOARG00000007403、ENSOARG00000007412、ENSOARG00000018872、ENSOARG00000007321、ENSOARG00000006342、ENSOARG00000006399、ENSOARG00000007219和ENSOARG00000000775。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述低氧适应性lncRNA的靶基因ENSOARG00000006342 qRT-PCR扩增引物为SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11;
所述低氧适应性lncRNA的靶基因ENSOARG00000006399 qRT-PCR扩增引物为SEQ IDNO.12和SEQ ID NO.13;
所述低氧适应性lncRNA的靶基因ENSOARG00000007219 qRT-PCR扩增引物为SEQ IDNO.14和SEQ ID NO.15;
所述低氧适应性lncRNA的靶基因ENSOARG00000007321 qRT-PCR扩增引物为SEQ IDNO.16和SEQ ID NO.17;
所述低氧适应性lncRNA的靶基因ENSOARG00000007330 qRT-PCR扩增引物为SEQ IDNO.18和SEQ ID NO.19;
所述低氧适应性lncRNA的靶基因ENSOARG00000007403 qRT-PCR扩增引物为SEQ IDNO.20和SEQ ID NO.21;
所述低氧适应性lncRNA的靶基因ENSOARG00000007412 qRT-PCR扩增引物为SEQ IDNO.22和SEQ ID NO.23;
所述低氧适应性lncRNA的靶基因ENSOARG00000018872 qRT-PCR扩增引物为SEQ IDNO.24和SEQ ID NO.25;
所述低氧适应性lncRNA的靶基因ENSOARG00000000775 qRT-PCR扩增引物为SEQ IDNO.26和SEQ ID NO.27。
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