[发明专利]一种原位快速检测细胞生物过程的方法有效
申请号: | 201710898955.7 | 申请日: | 2017-09-28 |
公开(公告)号: | CN107741417B | 公开(公告)日: | 2019-11-08 |
发明(设计)人: | 宋一之;徐嘉宝;王允 | 申请(专利权)人: | 上海氘峰医疗器械有限公司 |
主分类号: | G01N21/65 | 分类号: | G01N21/65 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 褚明伟 |
地址: | 201802 上海市嘉定区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 原位 快速 检测 细胞 生物 过程 方法 | ||
1.一种原位快速检测细胞生物过程的方法,其特征在于,活性细胞对含氘物质吸收、转化、代谢或存储后,会在细胞生物学过程的不同阶段中,在细胞中实现氘的原位标记,通过拉曼光谱对细胞进行检测,识别细胞中是否有氘的存在,进而得到关于细胞的生物化学过程、细胞性状或功能相关信息;
通过拉曼光谱对细胞进行检测的方法为:通过拉曼光谱仪采集细胞的拉曼图谱,拉曼光谱中在2000-2300cm-1之间出现特征峰,即C-D峰的细胞,表明细胞内有氘的存在;判断细胞拉曼图谱中C-D峰的存在以及胞内氘元素丰度的方法为:
以C-D峰最大值处的波长Xd为中心,设定范围Ad,范围Ad的边界处的波长为X1和X2,其中X1<Xd<X2,且X2-X1>7nm,设定范围Bd,范围Bd的边界处的波长为X0和X1,其中X1-X0=X2-X1,设定范围Cd,范围Cd的边界波长为X2和X3,其中X3-X2=X2-X1,计算C-D峰面积:
Sd=Sad-(Sbd+Scd)/2,其中Sad,Sbd和Scd分别为范围Ad,Bd和Cd内拉曼光谱下的面积;
以C-H峰最大值处的波长Yh为中心,设定范围Ah,范围Ah的边界为波长Y1和Y2,其中Y1<Yh<Y2,且Y2-Y1>9nm,设定范围Bh,范围Bh的边界为波长Y0和Y1,其中Y1-Y0=Y2-Y1,设定范围Ch,范围Ch的边界波长为Y2和Y3,其中Y3-Y2=Y2-Y1,计算C-H峰面积:
Sh=Sah-(Sbh+Sch)/2,其中Sah,Sbh和Sch分别为范围Ah,Bh和Ch内拉曼光谱下的面积;
细胞内氘元素的丰度计算公式为:D的丰度:D%=Sd/(Sd+Sh);
在同样条件下细胞暴露于不含氘的介质中,采集多个单细胞图谱,计算细胞中D的丰度的平均值D0和标准偏差δD0,
当细胞暴露于含氘的介质中,采集多个单细胞图谱,计算细胞中D的丰度D1,若D1≥D0+3δD0,则认为细胞的单细胞拉曼图谱中存在明显的C-D峰。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述含氘物质,为含有氘元素的物质,包括但不限于:氘水、氘代核酸、氘代氨基酸、氘代脂肪、氘代脂肪酸、氘代药物、氘代糖、氘代蛋白质,或由以上氘代化合物中一种或几种组成的氘代混合物。
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