[发明专利]菌根食用菌共生苗的培养基及其同步培养方法

说明书

本发明公开了菌根食用菌共生苗的培养基及其同步培养方法，菌根食用菌共生苗的培养基包括菌根食用菌菌种菌丝体培养基和菌根食用菌共生苗合成培养基，菌根食用菌菌种菌丝体培养基包括用于菌丝体扩大繁殖的固体培养基和用于培养菌根共生苗接种用菌丝体的液体培养基。利用上述培养基实施菌根食用菌共生苗合成的同步培养方法包括：（1）菌根食用菌菌种菌丝体的培养方法，（2）菌根食用菌共生苗的同步培养方法。本发明将菌根食用菌菌丝体的培养分为固体培养和液体培养两个阶段，采用液体菌种接种，同时与菌根苗合成培养基中的共生植物共同生长，使菌丝体侵染能力提高了30%以上，接种成功率提高了20%‑30%，共生植物苗和菌根菌的菌丝成活率都提高了20%以上。

技术领域

本发明技术领域属于食用菌栽培生产技术领域，具体涉及菌根食用菌共生苗的培养技术。

背景技术

菌根食用菌如松茸、块菌、牛肝菌、茯苓等是食用菌中一种非常重要的、具有很高食用价值的类群，在生长中与特定种类的共生植物形成共生根系，共同生长，相互供应生长物质，共生共存。这类食用菌需要与活体植物共生，通过活体植物根系接受植物的光合成产物，同时将它本身从土壤中吸收的养分供给活体植物利用，即形成植物-食用菌共生关系。目前人工栽培菌根食用菌共生苗的培养技术还没有实质性突破，产业化开发利用受到限制。通常的做法一般是先培养共生植物苗，以表面灭菌的种子在灭菌的培养基质中培养，将培养好的共生植物苗，接种上菌根食用菌菌种，然后将接种后的植物-菌根食用菌共生苗，在一定的温室或灭菌温室中培养，待菌根苗成长到一定程度大小，将其移植到生产场地，生成食用菌子实体。整个过程主要包括菌根食用菌菌种菌丝体培养，共生植物无菌苗的培育，在共生植物根系接种食用菌菌种，接种后的菌根苗的培养，以及养成的菌根苗移植到生产场地进行出菇培养。

2013年第34卷第1期《四川林业科技》公开的共生植物-菌根食用菌合成苗的制作方法是，收集云南松种子用水选法去除空壳种子，用0．1%的高锰酸钾液浸泡处理30min，然后再用清水浸泡1d～2d，灭菌处理后的云南松种子播入混合基质的培育箱中。培养基质在121℃～126℃的高压灭菌器下灭菌2.5h～3h，放置一周后使用。播种后，用清水将基质浇透后放置于室内催芽，待80%以上的种子发芽后再移入炼苗室内进行无菌苗培育。将培育好的云南松无菌苗浸泡在自来水里至根部基质松解，在适宜的容器内装入上述灭菌基质，至2/3深度，然后用小勺舀一勺约3g接菌剂（菌根食用菌接种菌液），在容器基质表面，将云南松无菌苗栽入，使根部与菌剂接触，然后覆盖基质压紧，用水浇透，将接种苗放置在炼苗室培育半月，期间适当浇水，然后移到温室大棚育苗架上培养6个月。上海农科院食用菌研究所付绍春等人在《食用菌学报》2009年16卷第1期报道了“美味牛肝菌与马尾松幼苗无菌条件下的外生菌根合成”的研究试验，针对菌根合成基质、宿主苗龄和接种方式进行了正交实验,通过对苗成活率、培养6个月的树苗地径和苗高、茎根比、菌根根尖数、菌根感染率6个指标的综合分析,证明在菌根合成中,采用模拟自然土壤结构的二层基质体系的菌根合成效果明显优于目前广泛使用的单层泥炭蛭石基质,且向基质中添加海泡石矿粉更有利于外生菌根菌的形成和发育。

现行的技术存在问题主要是：（1）整个操作过程中难以保证共生植物苗以及培养基质不受到环境中的杂菌污染；（2）所用接种菌液大部分是孢子悬浮液，接种后感染率较低；或者所用接种菌丝体采用固体培养基培养的菌丝体，其接种后的感染成功率也是较低的；（3）现行技术大多是先将共生植物培养成幼苗，再行接种菌丝体，其接种方法较难感染成功，进而，接种后的苗在定植过程中不易成活，特别是菌丝不易定着成活；（4）将接种后的植物苗栽植于培养基质中，再进行浇水，这时容易造成接种的菌种流失乃至死亡，致使植物苗根系接种菌种浓度降低，从而减少共生植物-菌根食用菌共生苗的成活率；（5）所形成的共生苗的培养较难，菌根食用菌种类与特异共生植物对生长基质有特异要求，普通培养基质难于适应菌根共生苗的菌与根的同时生长发育的要求。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术和方法存在的不足，提供一种菌根食用菌共生苗的培养基和同步培养方法，旨在解决现有技术培养菌根食用菌共生苗程序复杂、菌根侵染率低、成活率低等问题。