[发明专利]灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法

权利要求书

1.灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法，其特征在于：包括：供试品溶液的制备、对照品溶液的制备、高效液相色谱法测定；

所述高效液相色谱法测定的色谱条件为：InertSustain C18色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.05％～0.5％的甲酸水溶液，梯度洗脱方法；检测波长258nm，柱温35℃，流速为0.5～2.0mL/min；

所述梯度洗脱方法为：0～5min，2％～10％A；5～7min，2％～10％→30％～50％A；7～30min，30％～50％A；30～31min，30％～50％→70％～90％A；31～45min，70％～90％A。

2.根据权利要求1所述灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法，其特征在于：所述InertSustain C18色谱柱的型号为250×4.6mm，5μm，岛津色谱柱。

3.根据权利要求1所述灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法，其特征在于：所述流动相B为体积分数为0.1％的甲酸水溶液，流速为1.0mL/min。

4.根据权利要求1所述灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法，其特征在于：所述梯度洗脱方法为：0～5min，5％A；5～7min，5％→36％A；7～30min，36％A；30～31min，36％→85％A；31～45min，85％A。

5.根据权利要求1所述灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法，其特征在于：所述供试品溶液的制备方法为：精密量取灵芝糖浆10～30mL，以30～60mL乙酸乙酯进行萃取，重复萃取2～4次，合并上层液蒸干，残留物以甲醇溶解，定容于5～10mL容量瓶中，摇匀，微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。

6.根据权利要求5所述灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法，其特征在于：所述供试品溶液的制备方法为：精密量取灵芝糖浆20mL，以50mL乙酸乙酯进行萃取，重复萃取3次，合并上层液蒸干，残留物以甲醇溶解，定容于5mL容量瓶中，摇匀，以0.45μm微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。

7.根据权利要求1所述灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法，其特征在于：所述对照品溶液的制备方法为：取灵芝酸A对照品，加甲醇溶解制成100～200μg/mL的溶液，即得。

8.根据权利要求7所述灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法，其特征在于：所述对照品溶液的制备方法为：取灵芝酸A对照品，加甲醇溶解，制成133μg/mL的溶液，即得。

9.根据权利要求1所述灵芝糖浆中灵芝酸A成分的含量测定方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：精密量取灵芝糖浆10～30mL，以30～60mL乙酸乙酯进行萃取，重复萃取2～4次，合并上层液蒸干，残留物以甲醇溶解，定容于5～10mL容量瓶中，摇匀，微孔滤膜过滤，作为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取灵芝酸A对照品，加甲醇溶解制成100～200μg/mL的溶液，即得；

(3)测定方法：分别精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得；

所述测定的色谱条件为：InertSustain C18色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.05％～0.5％的甲酸水溶液，梯度洗脱方法；流速为0.5～2.0mL/min。